グルコシルトランスフェラーゼの活性を阻害するペプチドの解析

抑制葡萄糖基转移酶活性的肽的分析

• 批准号: 11771153
• 负责人: 江藤 亜紀子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771153/
• 关键词: Streptococcus mutans; グルコシルトランスフェラーゼ; ペプチド

本研究は、齲蝕細菌Streptococcus mutans(S.mutans)の増殖と同菌が分泌するグルカン合成酵素(グルコシルトランスフェラーゼ、GTF)の活性を特異的に阻害するペプチド性阻害剤の開発を目的とする。S.mutansのGTFの3種類のアイソザイムの中で、特に非水溶性グルカン合成酵素(GTF-I)が病原因子として重要であることが明かとなっており、まずGTF-Iを標的として、その一次構造由来ペプチド(GTFペプチド)が酵素活性に与える影響について検討した。GTF-I蛋白質の調整、及び精製は、前年度確立した方法に従って行った。また、19残基のGTFペプチドはF-moc法により合成した。GTFペプチドがGTF-Iの活性に与える影響をF-kit(ベーリンガー)を用いて測定したところ、新たに、スクラーゼの活性中心に相当するペプチドが酵素活性を阻害することを見い出した。昨年度阻害効果を明らかにしたペプチド1176-1194と同様に、精製したGTF-Iに対しても阻害効果を有し、酵素活性に対して特異的なものだと考えられた。このペプチドはGTF-Iのスクラーゼ活性とトランスフェラーゼ活性の両方を阻害した。ペプチド1176-1194とGTF-Iとの相互作用について解析するため、両者の結合をIASYSを用いて解析したところ、ペプチドとGTF-Iは2相性の結合をすることが明かとなった。さらに、ペプチド1176-1194の配列の中で阻害に必須の領域を明らかにするため、10、13、16残基の部分ペプチドを合成し、それらのGTF-Iに対する阻害活性を検討したところ、13残基以下のペプチドには阻害活がないことが明かとなった。

The aim of this study was to investigate the development of specific inhibitors against the proliferation and secretion of streptococci mutans(S.mutans), a caries-eroding bacterium, by means of enzyme synthesis (GTF). S.mutans GTF-I is an important pathogenic factor in the development of three kinds of GTF, especially water-insoluble GTF-I, and its primary structural origin and influence on enzyme activity. GTF-I protein regulation, purification, and the establishment of the previous year's methods The 19 residues of GTF were synthesized by F-moc method. GTF-I activity and its effects on F-kit were measured using the enzyme inhibitor, the enzyme inhibitor and the enzyme inhibitor. 1176-1194. The same process as GTF-I was used to determine the activity of enzymes. This is the first time that GTF-I has been active. The interaction between GTF-I and P1176 -1194 is analyzed and combined with IASYS. The interaction between GTF-I and P1176 - 1194 is analyzed and combined with GTF-I. In addition, some of the residues 1176-1194 in the sequence were synthesized and some of the residues 1176 - 1194 in the sequence of GTF-I were synthesized.

项目成果

Eto A.et al.: "Inhibitory Effect of a Self-derived Peptide on Glucosyltransferase of Streptococcus mutans"Journal of Biological Chemistry. 274. 15797-15802 (1999)

Eto A.等人：“自源肽对变形链球菌葡萄糖基转移酶的抑制作用”生物化学杂志。