口腔レンサ球菌のディフェンシン感受性の多様性とその機構の解析

口腔链球菌防御素敏感性多样性及其机制分析

• 批准号: 13771108
• 负责人: 江藤 亜紀子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: National Institute of Public Health (2002)National Institute of Infectious Diseases (2001)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771108/
• 关键词: 口腔レンサ球菌; 抗菌ペプチド; ディフェンシン; レンサ球菌

本研究は、抗菌ペプチドの臨床応用を目的として、口腔レンサ球菌のディフェンシンに対する感受性の解析を行った。研究期間内において、抗菌ペプチドの合成、口腔レンサ球菌に対するペプチドの抗菌活性の測定、ディフェンシンに対する抵抗性の高い口腔レンサ球菌が有する非感受性の機構の解析などを行った。ディフェンシンなどの抗菌ペプチドはペプチド合成機を用いてF-moc法により合成し、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)で精製を行った。口腔レンサ球菌に対する抗菌効果はradial diffusion assayによって測定した。22種の口腔レンサ球菌に対する2種類のヒトのβーディフェンシン、hBD-1とhBD-2の抗菌スペクトルを比較したところ、hBD-2の方が抗菌活性が高かった。22種の口腔レンサ球菌の感受性のレベルは多様であり、S.mitisは特に高い抵抗性を示した。さらに、ヒトの口腔で発現しているαーディフェンシン、HNP-4の口腔レンサ球菌に対する効果を測定したところ、口腔レンサ球菌の感受性は多様であったが、hBD-2とは全く異なる抗菌スペクトルを示した。これらの結果は、ディフェンシンファミリーが分子種ごとに異なる機能を有していることを示唆しており、これらを詳細に解析することにより、特異性の高い阻害剤として利用できる可能性を示している。さらに、hBD-2に対するS.mitisのように、抗菌ペプチドに対する感受性が低い菌は、抗菌ペプチドによる殺菌効果に対抗する何らかの機構を有しているのではないかと考え、培養上清への分泌成分および菌体表層成分の分離、精製、酵素活性の測定などの解析を行った。これらの結果は、抗菌ペプチドの臨床応用に必須の基礎的な知見であり、さらに、S.mitisはヒトロ腔内で最も優勢な常在菌の1つであることから、口腔内フローラの形成についても知見が得られると期待される。

The purpose of this study is to analyze the clinical efficacy of antibacterial bacteria and analyze the susceptibility of oral bacteria. During the study period, the synthesis of antibacterial and antibacterial bacteria, and the determination of the antibacterial activity of oral bacteria and bacteria,ディフェンシンに対するresistant の高い口レンサcoccus が有する不sensitivityのMechanismのanalytic などを行った. F-moc method for antimicrobial antibacterial synthetic machine High-speed liquid liquid purification and high-speed liquid purification (HPLC). The antibacterial effect of oral bacteria was measured using a radial diffusion assay. 22 kinds of oral bacteria, 2 kinds of oral bacteria, hBD-1とh BD-2's antibacterial properties are relatively high, and hBD-2's antibacterial activity is high. 22 species of oral bacteria have high susceptibility and high resistance to S.mitis.さらに, ヒトの口で発appears しているαーディフェンシン, HNP-4 の口レンサcoccus に対するeffectをdeterminationしたところ, oral レンサのsensitivity は多様であったが, hBD-2 とは全くisoなるantibacterial スペクトルを Show した.これらのRESULTは、ディフェンシンファミリーがmolecule species ごとにdifferentなるFUNCTION を有していることをshows唆しており, これらをDetailed analysis することにより, Specificity のHigh いHinder として Utilization できるPossibility を Show している.さらに、hBD-2 に対するS.mitis のように、antibacterial ペプチドIt has a low susceptibility to bacteria and has an antibacterial effect and has a bactericidal effect and is resistant to bacteria. The らかのINSTITUTION を有しているのではないかと考え, the culture supernatant へのsecreted component および bacterial surface component のseparation, purification, enzyme activity measurement などのanalytic を行った. Result of これらの、Antibacterial ペプチドのClinical application にNecessary basic な知见であり、さらに、S.mitis はヒトロ口The most advantageous bacteria inside the mouth are the bacteria that are always there, and the bacteria inside the mouth are formed and the bacteria are formed in the mouth.

项目成果

Nomura.Y, Eto A., Harada N., Senpuku H.: "Identification of Motif Binding with HLA-DR8 for Peptide Vaccine Against Streptococcus mutans"(in press).

Nomura.Y、Eto A.、Harada N.、Senpuku H.：“针对变形链球菌的肽疫苗与 HLA-DR8 的基序结合的鉴定”（出版中）。