ニホンザル大脳辺緑系における学習時期特異的遺伝子発現の定量解析

日本猕猴边缘系统学习期特异性基因表达的定量分析

• 批准号: 11780574
• 负责人: 奥野 浩行
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780574/
• 关键词: 霊長類; 認知長期記憶; 分離脳; 転写制御因子; 脳由来神経栄養因子; 定量的RT-PCR; 傍嗅皮質; 側頭葉

霊長類におい海馬や内嗅野皮質、周嗅皮質等などの側頭葉内側部は陳述記憶の形成に重要な働きを果たしている。本研究では視覚性対連合学習中のニホンザル側頭葉下部および辺縁系における遺伝子発現を定量的に解析し、陳述的長期記憶形成に相関した発現変化を示す遺伝子群同定を試みる。本年度はまず、in situ hybridization法に用いるプロープおよびPCR定量解析用のプライマー設計のため、c-fos,c-jun,zif268等の誘導型の転写制御因子や神経栄養因子群などの遺伝子をニホンザルより単離した。次に、定量実験を行う際の障害の一つとなる動物個体差を克服するため、脳梁及び前交連を切断した分離脳ザルを作成し、視覚性対連合課題を行わせた。課題に用いる刺激図形を左右視野別に提示することにより、一個体の左右の大脳半球それぞれ独立に視覚性記憶課題を行わせることが可能である。視覚刺激提示位置を厳密にコントロールするため、強膜磁場コイル法により眼球位置を計測した。左右視野それぞれに対連合課題と対照課題を提示してサルをトレーニングした後、大脳を速やかに摘出し、左右大脳半球それぞれから細胞構築学的・機能的に区分される側頭葉内側部の各領野からRNAを抽出した。RNAサンプル中の目標遺伝子mRNAは定量的RT-PCR法によって定量した。現在のところ、対連合課題学習時には傍嗅皮質〔特にブロードマン36野)においてzif268などの転写制御因子やBDNF等の神経栄養因子群のmRNA発現レベルが上昇するという結果を得ている。また、in situ hybridization法によるmRNA発現の解析も行ない同様の結果を得ている。来年度はさらに動物数を増やし、統計解析を含めた検討を行う。

霊 long class に お い や inside olfactory wild hippocampus cortex, weeks olfactory cortex な ど の head leaves the medial side of memory の は statement form に important な 働 き を fruit た し て い る. This study で は 覚 sexual moral commissure study の ニ ホ ン ザ ル side head lower lobe お よ び 辺 try department に お け る heritage 伝 発 を quantitative analytical し に now, presentation of long-term memory formation に masato し た 発 now - the を shown す heritage 伝 subgroup with fixed を try み る. This year は ま ず, in situ hybridization method に with い る プ ロ ー プ お よ び PCR quantitative analytical with の プ ラ イ マ ー design の た め, c fos, c - jun, zif268 の induction type の planning write suppression factor や god 経 tech students.their ownship raise factor group な ど の posthumous son 伝 を ニ ホ ン ザ ル よ り 単 from し た. Line に, quantitative be 験 を う interstate の handicap of の a つ と な る animal individual difference を overcome す る た め, 脳 beam and even before び を cut し た separation 脳 ザ ル を made し, regard 覚 commissure seaborne subject line を わ せ た. Subject に with い る stimulus 図 form around を vision don't に prompt す る こ と に よ り, an individual の の big 脳 hemispheres そ れ ぞ れ independent に 覚 sexual memory subject line を わ せ る こ と が may で あ る. 覚 stimulation prompts position を 厳 dense に コ ン ト ロ ー ル す る た め, strong magnetic field コ イ ル method に よ り を eye position measuring し た. About vision そ れ ぞ れ に commissure seaborne subject と polices according to subject を prompt し て サ ル を ト レ ー ニ ン グ し た, after big 脳 を speed や か に pick out し, big 脳 hemispheres そ れ ぞ れ か ら cells to construct learning, function of に distinguish さ れ る の side head leaf inside department received each wild か ら RNA を spare し た. RT-PCR によって quantification of <s:1> target progeny 伝 mRNA in RNAサ, <s:1>, プ and プ Now の と こ ろ, commissure seaborne subject learning に は alongside olfactory cortex (especially に ブ ロ ー ド マ ン 36 wild) に お い て zif268 な ど の planning write suppression factor や BDNF の god 経 tech students.their ownship raise factor group の mRNA 発 now レ ベ ル が rise す る と い う results て を い る. Youdaoplaceholder0, in situ hybridization method によるmRNA occurrence <s:1> analysis また line な また similar <s:1> result を て る る る る In the coming year, the number of さらに さらに animals を increased by や を, and statistical analysis を included めた検 figures を lines う.

项目成果

Li,Y-X.,Tokuyama,W.,Hashimoto,T.Miyashita,Y.,&Okuno,H.: "Quantitative evaluation of immeiate-early gene induction after unilateral labyrinthectomy in rats"Neuroscience Research Supplement. 24巻. S91-S91 (1999)

Li，Y-X.，Tokuyama，W.，Hashimoto，T. Miyashita，Y.，& Okuno，H.：“大鼠单侧迷路切除术后立即早期基因诱导的定量评估”神经科学研究增刊 24。 S91（1999）

Hashimoto,T.,Okuno,H.,W.,Li,Y-X,&Miyashita,Y.: "Laminar distribution of BDNF,NT-3 and receptor mRNAs in the macaque rhinal cortex"The Japanese Journal of Physiology. 47巻,Suppl.(in press). (1999)

Hashimoto, T.、Okuno, H.、W.、Li, Y-X 和 Miyashita, Y.：“猕猴鼻皮质中 BDNF、NT-3 和受体 mRNA 的层状分布”《日本生理学杂志》第 47 卷，补编。（正在出版）（1999）。

Okuno,H.,Tokuyama,W.,Li,Y-X.,Hashimoto,T.&Miyashita,Y.: "Quantitative evaluation of neurotrophin and Trk mRNA expression in visual and limbic areas along the occipito-temporo-hippocampal pathway in adult macaque monkeys"The Journal of Comparative Neurolog

奥野H.，德山W.，李Y-X.，桥本T.

Hashimoto,T.,Okuno.H.,Tokuyama,W.,Li,Y-X.&Miyashita.Y.: "Expression of brain-derived neurotrophic factor,neurotrophin-3 and their receptor messenger RNAs in monkey rhinal cortex."Neuroscience. 95巻. 1003-1010 (2000)

Hashimoto, T.、Okuno.、Tokuyama, W.、Li、Y-X 和 Miyashita。：“脑源性神经营养因子、神经营养素 3 及其受体信使 RNA 在猴鼻神经科学中的表达”。 95卷1003-1010（2000年）

Tokuyama,W.,Hashimoto,T.,Li,Y-X.,Okuno,H.&Miyashita.Y.: "Quantification of neurotrophin-3 mRNA in the rat hippocampal subresions using the RT-PCR-based coamplification method"Brain Research Protocols. 4巻3号. 407-414 (1999)

Tokuyama, W.、Hashimoto, T.、Li, Y-X.、Okuno, H. 和 Miyashita。：“使用基于 RT-PCR 的共扩增方法对大鼠海马亚区中的神经营养素 3 mRNA 进行定量”脑研究方案. 第 4 卷，第 3 号。407-414 (1999)