発生工学的手法を応用IFN-γおよびIL-6の肝炎における役割の解析

利用发育工程方法分析IFN-γ和IL-6在肝炎中的作用

• 批准号: 11780603
• 负责人: 田川 陽一
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780603/
• 关键词: コンカナバリンA; 肝炎; IFN-γ; IL-6; ノックアウトマウス; トランスジェニックマウス; テトラサイクリン誘導プロモーター; 抗IL-6抗体

コンカナバリンA(Con A)誘導肝炎は、ヒトウイルス性または自己免疫性肝炎のマウスモデルとして知られている。Con Aを投与するとIFN-γやIL-6をはじめとしてIL-1、IL-2、IL-4といった多くのサイトカインが誘導されるために、一般的な肝炎発症におけるIL-6やIFN-γの詳細な解析は難しい。IFN-γKOマウスを用いて、Con Aにより誘導されたIFN-γがFas-FasLシステムを活性化することによって肝臓細胞のアポトーシスを誘導し肝障害を起こすことがわかった。また、IL-6KOマウスや抗IL-6抗体投与実験により、Con A投与直後に誘導されるIL-6は肝炎に対して抑制的に働くが、Con A投与後後半のIL-6は肝炎を悪化させることもわかった。そこで次に、組織特異的誘導型IFN-γやIL-6過剰発現マウスを作成し、循環器系または肝臓特異的にIFN-γやIL-6を過剰発現させるシステムの開発を重点的におこなった。Con A刺激した脾臓細胞からマウスIFN-γおよびIL-6のcDNAをRT-PCRにより得た。これらのcDNAをテトラサイクリン誘導プロモータの下流に連結したレトロウイルスベクターを構築した。このベクターをエンベロープタンパク質産生細胞PT67細胞に導入し、培養上清中に感染性・非増殖性ウイルス粒子を得た。そして、これら外来遺伝子を持ったレトロウイルスをES細胞に感染させ、低コピーの遺伝子導入を行った。薬剤選別をおこない、これらの外来遺伝子が染色体DNAに組み込まれたESクローンを単離した。現在、これらのESクローンからキメラマウスを作成している。また、Con Aを投与する前にフルクトースキトサンや酸性糖タンパク質を投与すると、肝障害の誘導が抑えられることがわかった。これらの糖/糖タンパク質は、免疫細胞の活性化に関わっていることが知られており、サイトカイン産生と関わっているかどうかを検討している。

The immune response to hepatitis A(Con A) is not the same as that of autoimmune hepatitis. IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-7, IL-6, IL-7, IL-8, IL-6, IL-7, IL-7, IL-8, IL-8, IL-9, IL- IFN-γKO gene expression, Con A gene expression, IFN-γ Fas-FasL gene expression, IFN-γ Fas-L gene expression, IFN-γ-L gene expression, IFN-γ-1 gene IL-6KO also provides anti-IL-6 antibody therapy, IL-6 anti-hepatitis antibody therapy and IL-6 anti-hepatitis antibody therapy. In addition, tissue-specific inducible IFN-γ and IL-6 production is important for the development of circulating system and liver-specific IFN-γ and IL-6 production. Con A stimulated spleen cells to produce IFN-γ and IL-6 cDNA This cDNA sequence is linked to the downstream structure of the cDNA sequence. The infectious and non-proliferative cells were obtained from the culture supernatant introduced into PT67 cells. The infection of ES cells with foreign genes and the introduction of foreign genes into ES cells The selection of foreign genes from chromosome DNA is very important. Now, we're going to have to do something about it. The first step is to reduce the risk of liver damage. The sugar/sugar ratio is higher than that of the active immune cells, and the activation of immune cells is higher than that of the active immune cells.

项目成果

Tsuji, H., et al.: "Alleviation of lipopolysaccharide-induced acute liver injury in Propionibacterium acnes-primed IFN-γ-deficient mice by a concomitant reduction of TNF-α, IL-12 and IL-18 production."J. Immunol.. 162. 1049-1055 (1999)

Tsuji, H. 等人：“通过同时减少 TNF-α、IL-12 和 IL-18 的产生，减轻痤疮丙酸杆菌引发的 IFN-γ 缺陷小鼠中脂多糖诱导的急性肝损伤。”免疫学.. 162. 1049-1055 (1999)

He, J., et al.: "Kinetics of cytokine production in the cornea and trigeminal ganglion of C57BL/6 mice after corneal HSV-1 infection."J. Interferon Cytokine Res.. 19. 609-615 (1999)

He, J. 等人：“角膜 HSV-1 感染后 C57BL/6 小鼠角膜和三叉神经节中细胞因子产生的动力学”。

Hyodo, Y., et al.: "IL-18 Up-Regulates Perforin-Mediated NK Activity Without Increasing Perforin Messenger RNA Expression by Binding to Constitutively Expressed IL-18 Receptor."J. Immunol.. 162. 1662-1668 (1999)

Hyodo, Y. 等人：“IL-18 通过与组成型表达的 IL-18 受体结合，上调穿孔素介导的 NK 活性，而不增加穿孔素信使 RNA 表达。”

Yoneto,T., et al.: "A critical role of Fc receptor-mediated antibody-dependent phagocytosis in the host resistance to blood-stage plasmodium berghei XAT Infection."J.Immunol.. (In press). (2001)

Yoneto,T. 等人：“Fc 受体介导的抗体依赖性吞噬作用在宿主抵抗血期伯氏疟原虫 XAT 感染中的关键作用。”J.Immunol..（正在出版）。

Igarashi, I., et al.: "Roles of CD4(+)T cells and gamma interferon in protective immunity against Babesia microti infection in mice."Infect. Immun.. 67. 4143-4148 (1999)

Igarashi, I., et al.：“CD4( )T 细胞和γ干扰素在小鼠对抗田鼠巴贝虫感染的保护性免疫中的作用。”感染。