肝臓の再生医学研究のためのモデル動物の開発とES細胞を用いた肝細胞の再生

肝脏再生医学研究模型动物的开发以及使用ES细胞的肝细胞再生

• 批准号: 15700314
• 负责人: 田川 陽一
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology (2005)Shinshu University (2003-2004)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15700314/
• 关键词: 肝組織; ES細胞; 器官形成; 分化誘導; 薬物代謝; 肝機能; テストステロン; 薬物動態; 赤色蛍光マウス; DsRedトランスジェニックマウス; 赤色蛍光ES細胞; 胚性幹細胞; 肝細胞; 再生医学; Con A誘導肝炎; カテキン; 肝; ビスマルトレート

昨年度にマウスES細胞から、肝実質細胞のみならず、肝非実質細胞である血管(類洞)内皮細胞と肝実質細胞が共に分化・出現する肝組織分化誘導システムの開発に成功(Ogawa, S, Y.Tagawa, et al.,Stem Cells)した。本年度はこのマウスES細胞由来肝組織分化誘導システムが薬物動態試験への応用が可能であることを示した(Tsutui, M, ・・・, and Y.Tagawa, Drug Metabolism and Disposition 印刷中)。まず、このマウスES細胞由来肝組織中の薬物代謝に関連するチトクロームP450遺伝子ファミリーがマウス胎仔肝や成体肝実質細胞と同様に発現していることをRT-PCRで確認した。これらの発現しているCYPが実際に活性を持っているかどうかを調べるために、マウスES細胞由来肝組織のメディウム中にテストステロンを添加し、その水酸化箇所と活性を検討した。成体肝実質細胞の水酸化パターンとは異なったが、マウス胎仔肝と全く同様に6β、16α、2α、2βが水酸化を受け、15α、7α、16βが水酸化を受けなかったことがHPLCによる解析でわかった。この水酸化活性は、胎仔肝や成体肝実質細胞に比べると、非常に高いことが確認できた。このことは、アンモニアの代謝能力と同様であり、in vitroの肝実質細胞の肝機能活性よりも個体における肝臓器官の活性に近いことが示唆された。さらに、CYPの活性は誘導されることも知られているので、フェノバルビタールを添加した後に、テストステロンの水酸化誘導能の変化について検討した。テストステロンの6βと16βに関して約2.5倍の水酸化活性の誘導が確認できた。以上のことから、このマウスES細胞由来肝組織は、CYPに関連する薬物代謝活性を十分に持っていることがわかり、肝臓の薬物代謝能力の獲得メカニズムの解析に有効であることが示唆できた。

Yesterday's annual に マ ウ ス ES Cells か ら, liver be stromal Cells の み な ら ず, liver not be stromal Cells で あ る vascular endothelial Cells (hole) と liver be stromal Cells が total に appear differentiation, す る liver tissue differentiation inducing シ ス テ ム の open 発 に success (Ogawa, S, Y.T agawa, et al., Stem Cells) し た. In the current year, the <s:1> とを 応 ウス ウス ウスES cells derived from liver tissue differentiation-induced システムが Drug dynamics experiment へ <s:1> 応 by が may である である とを とを とを show た(Tsutui, M,..., and y. agawa, Drug Metabolism and Disposition in print). ま ず, こ の マ ウ ス ES cell origin in the liver tissue の 薬 material metabolism に masato even す る チ ト ク ロ ー ム P450 posthumous son 伝 フ ァ ミ リ ー が マ ウ ス tire tsai liver や adult liver be stromal cells と with others に 発 now し て い る こ と を rt-pcr で confirm し た. こ れ ら の 発 now し て い る CYP が be に activity を hold っ て い る か ど う か を adjustable べ る た め に, マ ウ ス ES cell origin of liver tissue の メ デ ィ ウ ム in に テ ス ト ス テ ロ ン を add し, そ の と activity by water acidification を beg し 検 た. Adult liver be stromal cells の water acidification パ タ ー ン と は different な っ た が, マ ウ ス tire seed with others in liver と く all に June 16 alpha, beta, alpha, beta 2 2 が water acidification を け, 15 alpha, 7 alpha, beta が water acidification を 16 by け な か っ た こ と が HPLC に よ る parsing で わ か っ た. The water acidification activity of <s:1> and fetal liver や adult liver parenplasmic cells に is に higher than べると and very に. The <s:1> とが とが confirms that で た た た. こ の こ と は, ア ン モ ニ ア の ability to metabolize と with others で あ り, the in vitro liver be stromal cells の の liver function active よ り も individual に お け る liver viscera organs の active に nearly い こ と が in stopping さ れ た. さ ら に, CYP の activity induced さ は れ る こ と も know ら れ て い る の で, フ ェ ノ バ ル ビ タ ー ル を add し た に, after テ ス ト ス テ ロ ン の water acidification can induce の variations change に つ い て beg し 検 た. Youdaoplaceholder0 <e:1> <s:1> 6βと16βに is related to the approximately 2.5 times <s:1> water acidification activity <e:1> inducing が confirmation で た た た. Above の こ と か ら, こ の マ ウ ス ES cell origin of liver tissue は, CYP に masato even す る 薬 content metabolic activity を very に hold っ て い る こ と が わ か り routine, liver の 薬 material metabolism ability の get メ カ ニ ズ ム の parsing に have sharper で あ る こ と が in stopping で き た.

项目成果

国内特許

国内专利

• 发表时间: 2006

Kawase, M., et al.: "Liver protection by bis(maltolato)zinc(II) complex."Exp.Anim.. 53. 1-9 (2004)

Kawase, M., et al.：“双（麦芽糖）锌（II）复合物对肝脏的保护。”Exp.Anim.. 53. 1-9 (2004)

Kagaya, N., et al.: "Novel function of rare catechin, epigallocatechin-3-(3''-O-methyl) gallate, against cold injury in primary rat hepatocytes."J.Biosci.Bioeng.. 96. 559-563 (2003)

Kagaya, N., 等人：“稀有儿茶素，表没食子儿茶素-3-(3-O-甲基)没食子酸酯，对抗原代大鼠肝细胞冷损伤的新功能。”J.Biosci.Bioeng.. 96. 559

田川陽一: "特集「発生工学」"生物工学会誌. 81. 343-360 (2003)

Yoichi Takawa：“发育工程专题”生物工程学会杂志 81. 343-360 (2003)。

Sehra, S., et al.: "Airway IgG counteracts specific and bystander allergen-triggered pulmonary inflammation by a mechanism dependent on FcγR and IFN-γ."J.Immunol.. 171. 2080-2089 (2003)

Sehra, S., 等人：“气道 IgG 通过依赖于 FcγR 和 IFN-γ 的机制抵消特异性和旁观者过敏原引发的肺部炎症。J.Immunol.. 171. 2080-2089 (2003)