複雑心奇形に伴うカルシウム代謝異常に関する分子生物学的研究

复杂心脏畸形相关钙代谢异常的分子生物学研究

• 批准号: 12770394
• 负责人: 南 弘一
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770394/
• 关键词: 22q11.2症候群; 副甲状腺機能低下症; 複雑心奇形; 分子生物学

染色体22q.11の欠失する複雑心奇形に伴う副甲状腺機能低下症において、副甲状腺カルシウム感受性受容体の突然変異(ミスセンス変異、欠失、挿入)や転座を検討している。研究計画に従って、対象の染色体22q11.2欠失を伴う心奇形例、25例(副甲状腺機能低下症を示す群15例、副甲状腺機能正常群10例)において、Genomic DNAを抽出し、また分離したリンパ球をEB virusに感染させて、リンパ球由来細胞株の樹立を行い、genomic DNAを各種制限酵素で切断後、アガロース電気泳動でDNAフラグメントを分離し、サザンブロット法を行った。全例施行していないが、ヒト副甲状腺カルシウム感受性受容体に対して、サザンブロット法では陽性のバンドを検出できている。またヒト副甲状腺カルシウム感受性受容体に対するセンス・アンチセンスプライマーを利用して、DNA PCRを行い、PCR産物を各種制限酵素で切断し、SSCPを行った。正常コントロールを比べて、バンドに差を認めた症例において、PCR産物のDNAシークエンシングを行っている。ヒト副甲状腺カルシウム感受性受容体の突然変異の疑い例で塩基配列の決定を行っているが、まだ変異を確認していない。

The deletion of chromosome 22q.11 is associated with hypoparathyroidism, sudden changes in parathyroid-sensitive receptors, and analysis of loci. Study project: chromosome 22q11.2 missing, 25 cases of heart disease (Hypoparathyroidism group: 15 cases; Hypoparathyroidism group: 10 cases) Genomic DNA was isolated from EB virus infected cells, isolated from EB virus infected cells, isolated The law of the land. The whole case is implemented, the receptive receptors of the parathyroid gland are compared, and the anti-positive receptors of the Sendanbrot method are detected. The use of DNA PCR and the cleavage of PCR products by various restriction enzymes Normal DNA sequence analysis, DNA sequence analysis, PCR product analysis The sudden change of receptor in thyroid gland is suspected, and the determination of base alignment is confirmed.