赤血球造血における転写因子FKHRL1の分子生物学的検討

转录因子FKHRL1在红细胞生成中的分子生物学研究

• 批准号: 12770395
• 负责人: 柏井 良文
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770395/
• 关键词: エリスロポエチンシグナル伝達; 赤血球造血; フォークヘッドファミリー転写因子; FKHRL1; アポトーシス; Akt; ホスファチジルイノシトール3キナーゼ; UT-7

【目的】細胞内シグナル伝達機構の解析を通してin vitroにおける細胞の分化、増殖、アポトーシス抑制のメカニズムを明らかにし、それらの制御破綻がどのような造血障害を起こしうるのかをin vivoのレベルで明らかにすることは血液疾患の病態の解明と治療戦略を追究する上で極めて重要であると考えられる。FKHRL1は2次性白血病で認められたt(6;11)(q21;q23)転座におけるMLL遺伝子の新しい融合相手として発見されたForkhead転写因子である。この転写因子は非常に広範な種で保存されており、胚形成、分化、腫瘍発生など生物にとって重要な機能を担っていることが推測される。我々はFKHRL1がエリスロポエチンやトロンボポエチンシグナルの下流に存在することを明らかにし、造血系においてFKHRL1がなんらかの機能を担っている可能性を示唆した。そこで本研究ではFKHRL1の造血における役割を明らかにするために、活性型FKHRL1のトランスジェニックマウス作製を作製し、赤血球造血における機能を解明した。【結果】FKHRL1TMトランスジェニックマウスTgは赤芽球・巨核球系に特異的に発現する転写因子GATA-1の発現調節領域の下流にFKHRL1TM連結させたコンストラクトを用いて作製した。現在2系列のTgマウスの樹立に成功している。血小板数ならびにヘモグロビン値および巨核球、赤芽球系前駆細胞は共に正常範囲であった。今後はこれらの値をモニターしながら造血障害発症の有無について観察を続ける予定である。さらに抗癌剤による骨髄抑制後の赤血球や巨核球・血小板回復への影響を検討し、赤芽球系や巨核球系前駆細胞の増幅におけるFKHRL1の役割を解析する予定である。

[Objective] Through the analysis of intracellular intracellular signaling mechanisms in vitro, it is extremely important to clarify the mechanisms of cell differentiation, proliferation, and apoptosis inhibition, and to clarify the flaws in the control mechanism and cause hematopoietic impairment in vivo, and to investigate the pathologies and treatment strategies of blood diseases. FKHRL1 is a secondary leukemia. It is recognized by t(6;11)(q21;q23) as a new fusion factor in MLL gene. These factors are very important for the preservation of species, embryogenesis, differentiation, and development of tumors, and for biological functions. I want to show you the possibility that FKHRL 1 may function differently from the original system. In this study, the function of FKHRL1 in hematopoiesis and erythropoiesis was elucidated. [Results] FKHRL1 TM link was used in the downstream of the expression regulation domain of GATA-1 in the specific expression of FKHRL1 TM in the red bud and megakaryocyte system. Now the 2 series Tg has been successfully established. Platelet count is normal for megakaryocytes and erythrocytes. In the future, the value of the disease will be determined by the presence or absence of hematopoietic impairment. To investigate the effects of anti-cancer agents on erythrocyte, megakaryocyte and platelet recovery after bone marrow suppression, and to determine the role of FKHRL1 in the amplification of erythroid megakaryocyte precursor cells.

项目成果

Yoshifumi Kashii: "A member of Forkhead family transcription factor, FKHRL1, is one of the downstream molecules of phosphatidylinositol 3-kinase-Akt activation pathway in erythropoietin signal transduction"Blood. 96・3. 941-949 (2000)

Yoshifumi Kashii：“Forkhead 家族转录因子的成员 FKHRL1 是促红细胞生成素信号转导中磷脂酰肌醇 3-激酶-Akt 激活途径的下游分子”Blood.941-949。

Masaru Tanaka: "Forkhead family transcription factor FKHRL1 is expressed in human megakaryocytes and regulates cell cycling as a downstream molecule of TPO signaling"J Biol Chem. (in press). (2001)

Masaru Tanaka：“叉头家族转录因子 FKHRL1 在人类巨核细胞中表达，并作为 TPO 信号下游分子调节细胞周期”J Biol Chem。