"機能を持った人工皮膚"の作製(1)〜皮膚三次元培養におけるエクリン汗腺の誘導

“功能性人造皮肤”的打造（一）——三维皮肤培养中小汗腺的诱导

• 批准号: 12770444
• 负责人: 敷地 孝法
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770444/
• 关键词: 皮膚三次元培養; 再成; epidennal growth factor; stem cell; エクリン汗腺; epidermal growth factor

人工皮膚の培養は今日ではポピュラーとなり,熱傷などの植皮片として利用されている。ところがこれらの人工皮膚には毛や汗腺など皮膚付属器がない。今回我々は皮膚三次元培養型を用いて,エクリン汗腺再生を試みた。方法としては線維芽細胞を巻き込んで培養し収縮させた1型コラーゲンゲル上に表皮細胞を播き空気に触れさせて培養することで重層化させた。この際,培地内に血清とEGF(epidermal growth factor)を15ng/ml以上加えると,表皮細胞が若いドナー由来の場合に限り表皮がコラーゲンゲル内に浸潤し一部で管腔構造を形成した。これらは表皮細胞の部位,線維芽細胞の年齢,部位に影響されなかった。EGFを加えると重層化上皮と管腔構造の内方でCEA(carcinoem bryonic antigen)が陽性に染まったが,ケラチン染色では再生上皮のパターンを示しエクリン汗腺と全く一致したわけではなかった。PCNA(proliferating cell nuclear antigen)染色ではEGFの有無で重層化上皮の染色パターンに差はなく,また深く浸潤した表皮細胞ではPCNAが陰性なことより,EGFは単に表皮細胞の増殖を亢進しているのではなくエクリン汗腺への分化に関与していることが示唆された。この表皮細胞の代わりにエクリン汗管のみからなる上皮細胞を用いた場合では,このような浸潤はみられなかった。逆に扁平上皮癌のcell lineを用いた場合,EGFの有無にかかわらずびまん性の浸潤がみられたが管腔構造はみられなかった。以上より,若いヒトの表皮にはエクリン汗腺への分化能を持った細胞(stem cell?)が残存する可能性があり,これらの細胞の分化に伴う浸潤様式は癌細胞のそれとは異なると考えられた。

Artificial skin culture is now a hot topic, and skin grafts are used in the treatment of heat injury. The artificial skin is made of sweat glands. This time, I will try to use the three-dimensional culture model of skin to regenerate sweat glands. Methods: To culture the epidermal cells in vitro and to re-culture the epidermal cells in vitro At this time, EGF(epidermal growth factor) in serum above 15ng/ml was added to the culture medium, and the epidermal cells were limited in some cases. The position of epidermal cells, the position of embryonic cells, and the position of epidermal cells are affected. EGF was added to the stratified epithelium and the inner part of the luminal structure was stained positively with CEA(carcinoem bryonic antigen). PCNA(proliferating cell nuclear antigen) staining showed that EGF was present and absent in stratified epithelium, and PCNA was negative in deeply infiltrated epidermal cells. EGF was present in epidermal cell proliferation and proliferation and related to sweat gland differentiation. The epithelial cells are used to infiltrate the sweat ducts. When the cell line of squamous cell carcinoma is used,EGF is present and invasive. If the epidermis of the epidermis is divided into three parts, the differentiation of sweat glands can be maintained in stem cells. The probability of survival is higher than that of invasion.