新しい造血肝細胞体外増幅法の実用化

新型造血肝细胞体外扩增方法的实际应用

• 批准号: 12770557
• 负责人: 高橋 宗春
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770557/
• 关键词: 造血幹細胞; 体外増殖; レトロウイルス; Notch; HES; 体外増幅; アデノウイルス; AGM

造血幹細胞の試験管内増幅は、現在の造血幹細胞移植療法を補完する上でも、また将来の遺伝子治療や人工血液の開発の上でも、極めて応用性の高い技術である。この技術開発を行う上で肝要なことは、いかにして分化させることなく幹細胞を増幅するかという点である。Notchは細胞膜受容体型の糖蛋白質であり、細胞の分化を抑制するシグナルを伝達する。このため、造血幹細胞を未分化なまま体外で増幅する技術の開発につながるのではないかと期待されている。本研究では、Notchのシグナルを用いて造血幹細胞の体外増幅の可能性を検討した。当初アデノウイルスを用いていたが、最近レトロウイルスベクターの改良により、幹細胞活性を持つ細胞への遺伝子導入が容易に行うことができるようになった。本研究ではレトロウイルスベクターを用い、Notchシグナル分子であるHES-1をマウス骨髄造血幹細胞分画(Lin-Scal+c-Kit+CD34-)に導入した。これを放射線照射同系マウスに移植することにより、造血幹細胞が試験管内およびレシピエントマウス個体内で、コントールに比べより維持されるか否かを検討した。HES-1導入造血幹細胞は試験管内で2日間、および移植されたマウス個体で3ヶ月、コントロール細胞に比較してより維持され、全ての系統の造血細胞を再構築した。HES-1シグナルは、造血幹細胞の体外増幅に有用と考えられた。今後は、NotchリガンドによりHES1の発現誘導が得られること、および、Notchリガンドを用いてHES1導入と類似の効果が得られることの検証を行う計画である。

The hematopoietic stem cells are scraped in the tube, now the hematopoietic stem cell transplantation method is completed, and the artificial blood system is used in the future, and the use of high technology is very important. In the course of the operation of the technology, the liver is going to be sick, and the liver is going to be divided into two parts. The membrane receptive type of Notch, glycoprotein receptor and cell differentiation inhibit the expression of glycoprotein in the cell membrane. The undifferentiated hematopoietic cells and hematopoietic progenitor cells are not differentiated. In vitro, we are looking forward to the opening of the technology in vitro. In this study, the possibility of hematopoietic cells in vitro was measured by Notch. In the first place, it was used to improve the quality of the cells, and the activity of the cells was found to be easy to use. In this study, Notch molecules, HES-1 molecules, bone marrow hematopoietic cells, cell fraction (Lin-Scal+c-Kit+CD34-), cell fraction were detected. Radiation exposure to orthotopic transplantation is related to the development of hematopoietic stem cells, hematopoietic cells and hematopoietic cells. HES-1 was implanted into hematopoietic progenitor cells within 2 days, 3 months after transplantation, and the hematopoietic progenitor cells of whole system were reactivated. HES-1 and hematopoietic progenitor cells are useful in vitro. In the future, you will need to know that you can use the HES1 to enter the HES1 command in the future, and you will find that you need to make sure that you can use the HES1 to get the correct information.

项目成果

Takayanagi,H.: "Suppression of arthritic bone destruction by adenovirus-mediated csk gene transfer to synoviocytes and osteoclasts."J.Clin.Invest. 104. 137-146 (1999)

Takayanagi,H.：“通过腺病毒介导的 csk 基因转移至滑膜细胞和破骨细胞来抑制关节炎骨质破坏。”J.Clin.Invest。

Shimizu,K.: "Binding of Delta1,Jagged1, and Jagged2 to Notch2 Rapidly Induces Cleavage, Nuclear Translocation, and Hyperphosphorylation of Notch2"Mol.Cell.Biol.. 20. 6913-6922 (1999)

Shimizu,K.：“Delta1、Jagged1 和 Jagged2 与 Notch2 的结合快速诱导 Notch2 的切割、核易位和过度磷酸化”Mol.Cell.Biol.. 20. 6913-6922 (1999)

Kurokawa,M.: "The Evi-l oncoprotein inhibits c-Jun N-terminal kinase and prevents stress-induced cell death."EMBO J.. 19. 2958-2968 (2000)

Kurokawa,M.：“Evi-1 癌蛋白抑制 c-Jun N 末端激酶并防止应激诱导的细胞死亡。”EMBO J.. 19. 2958-2968 (2000)

Shimizu K, Chiba S, Kumano K, Hosoya N, Takahashi T, Hamade Y, Yazaki Y, Hirai H: "Binding of Delta1, Jagged1, and Jagged2 to Notch2 rapidly induces cleavage, nuclear translocation and hyperphosphorylation of Notch2"Mol. Cell. Biol.. 20. 6913-6922 (2000)

Shimizu K、Chiba S、Kumano K、Hosoya N、Takahashi T、Hamade Y、Yazaki Y、Hirai H：“Delta1、Jagged1 和 Jagged2 与 Notch2 的结合快速诱导 Notch2 的裂解、核易位和过度磷酸化”Mol。

Miyazaki,T.: "In Vitro and In Vivo Suppression of Osteoclast Function by Adenovirus Vector-Induced csk Gene."Journal of Bone and Mineral Research. 15. 41-51 (2000)

Miyazaki,T.：“腺病毒载体诱导的 csk 基因对破骨细胞功能的体外和体内抑制。”骨与矿物质研究杂志。