移植後レシピエントにおける末梢血活性化T細胞内カルシウム濃度の測定意義

测量移植后受者外周血活化 T 细胞钙浓度的意义

• 批准号: 12770676
• 负责人: 秋吉 建二郎
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770676/
• 关键词: Tリンパ球; カルシウム濃度; 移植; 拒絶反応; T細胞内カルシウム濃度

1.移植モデルDAラットをドナー,Lewisラットをレシピエントとする肝移植モデルの作製手技を確立した。さらに移植後2日目,5日目,7日目のそれぞれの移植片をH.E染色したのち病理組織学的に検討し,本移植モデルの病理組織学的な拒絶時期を考察した。これにより2日目には拒絶反応は起こっておらず,5日目には拒絶反応が完成されていることがわかった。2.リンパ球の観察レシピエントの脾臓を摘出し,ナイロンウールカラム法などを用いてTリンパ球を分離した。これに蛍光色素であるFura-2を添加し,ハロゲンランプを用いた蛍光顕微鏡下でTリンパ球の発色を確認した。さらに移植後2日目,5日目,7日目のそれぞれのラットTリンパ球を分離し,これに抗原物質(抗TCR抗体)を反応させ,340mnと380mnの2つの条件下でTリンパ球の発色を確認したのちこれをビデオテープに録画し,濃度解析の準備を行った。3.カルシウム濃度の測定既知の濃度のカルシウム溶液にFura-2を添加し,上記と同様に340mnと380mnの2つの条件下で発色させ,蛍光解析装置を用いてカルシウム濃度の検量線を作成した。ビデオテープに録画しておいたTリンパ球の発色をこの検量線を用いて解析し,カルシウム濃度の測定を行った。4.結果現在検体数を増やしている段階であり,具体的な解析は行えていない。5.今後の予定結果の解析ののちそれに対する考察を行い,日本小児外科学会総会やその他各種の学会・研究会にて発表し,英文誌に投稿する。

1. Transplant モ デ ル DA ラ ッ ト を ド ナ ー, Lewis ラ ッ ト を レ シ ピ エ ン ト と す る liver transplantation モ デ ル の cropping manipulation を establish し た. さ ら に transplantation after 2, 5, 7 eyes の そ れ ぞ れ の stents を H.E staining し た の ち pathological histology of に 検 for し, this transplantation モ デ ル の histologic を な refused to period of し た. こ れ に よ り 2 orders に は refused to reverse 応 は up こ っ て お ら ず, 5 eyes に は refused to reverse 応 が complete さ れ て い る こ と が わ か っ た. 2. リ ン パ ball の 観 examine レ シ ピ エ ン ト の splenic を pick out し, ナ イ ロ ン ウ ー ル カ ラ ム method な ど を with い て T リ ン パ ball を separation し た. こ れ に 蛍 photopigment で あ る Fura - 2 add し を, ハ ロ ゲ ン ラ ン プ を with い た 蛍 optical 顕 microscopically で T リ ン パ ball の 発 を confirmation し た. さ ら に transplantation after 2, 5, 7 eyes の そ れ ぞ れ の ラ ッ ト T リ ン パ ball を separation し こ れ に antigen (antibody) which is the resistance を anti 応 さ せ, 340 mn と 380 mn の 2 つ で の conditions T リ ン パ ball の 発 を confirmation し た の ち こ れ を ビ デ オ テ ー プ し に record picture, concentration of analytical の preparation line を っ た. 3. カ ル シ ウ ム concentration determination の already know の concentration の カ ル シ ウ ム solution に Fura - 2 add し を, written と with others に 340 mn と 380 mn の 2 つ の conditions で 発 color さ せ, analytical device を 蛍 light with い て カ ル シ ウ ム concentration の 検 quantity line を made し た. ビ デ オ テ ー プ に recorded painting し て お い た T リ ン パ ball の 発 color を こ の を 検 quantity line with い て parsing し, カ ル シ ウ ム concentration determination の を line っ た. 4. Now 検 body number を raised や し て い る Duan Jie で あ り, concrete analytical は な line え て い な い. 5. の in the future to decide the result analytical の の の ち そ れ に す seaborne る を line い, small Japan where surgeons will 総 や そ の various の he learn, seminar に て 発 table し, english-speaking volunteers contribute に す る.