CDDP併用放射線療法による膀胱癌の治療効果とマイクロサテライト領域の関連

CDDP联合放疗膀胱癌疗效与微卫星区的关系

• 批准号: 12770869
• 负责人: 和田 尚
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770869/
• 关键词: 膀胱癌; マイクロサテライトマーカー; LOH解析; 第9番染色体

インフォームドコンセントして承諾を得ている膀胱癌症例を対象とした。治療前に膀胱癌標本を採取してからCDDP併用放射線療法を施行した。1)治療の終了した45例の膀胱癌組織(治療前のパラフィン標本)と患者末梢血のそれぞれからDNAを抽出した。2)複数の癌抑制遺伝子(p16,PATCHED,DBC1)のinternal gene markerも含めて,9番染色体のマイクロサテライトマーカー15個(D9S259,D9S942,D9S922,1AJL,D9S774,D9S938,D9S930,D9S302,D9S934,D9S195,D9S1199,D9S156,D9S1748,D9S171,D9S970)を選択した。3)膀胱癌DNAと同一患者末梢血DNAを用いて,2-4個のマーカーを1セットとして,multiplex-PCRを行った。得られたPCR productにsize standardを混ぜて4%ポリアクリアルアミドゲル電気泳動を施行した(蛍光DNA sequencer ABI377を使用)。4)各マーカーごとに膀胱癌DNAと患者末梢血DNAの2つのalleleのピーク領域(GeneScan)を計算した。癌DNAの減少した側のalleleのピーク領域が,末梢血DNAの同側alleleのピーク領域に比較して,50%以下となるマーカーを共通欠失領域(lossof heterozygosity;LOH)とした。5)現在35膀胱癌症例について検討中である。D9S259 locusではLOHが7例中6例に認められた。D9S942 locusではLOHが12例中5例に認められた。まだ実験中であるが,15マーカーのうち,12マーカーにおいて1症例以上でLOHが観察された。今後さらにLOH解析を続けて,各マイクロサテライト領域でのLOHの発現とCDDP併用放射線療法の治療効果との相関を検討する予定である。

イ ン フ ォ ー ム ド コ ン セ ン ト し て commitment を must て い る bladder cancer cases を like と seaborne し た. Before treatment, に bladder cancer specimens を were treated with <s:1> て ら らCDDP and <s:1> た were performed with radiation therapy を. 1) at the end of treatment の し た 45 cases の bladder cancer group (treatment before の パ ラ フ ィ ン specimens) と の patients peripheral blood そ れ ぞ れ か ら を DNA extraction し た. 2) Multiple oncosuppressor genes 伝 (p16,PATCHED,DBC1) are <s:1> internal genes Marker も containing め て, 9 chromosome の マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト マ ー カ ー 15 (D9S259 D9S942, D9S922, 1 ajl, D9S774, D9S938, D9S930, D9S302, D9S934, D9S195, D9S1199, D9S156, D9S 1748,D9S171,D9S970)を choose 択 た. 3) patients with bladder cancer DNA と same peripheral blood DNA を with い て, 2 to 4 の マ ー カ ー を 1 セ ッ ト と し て, multiplex PCR - line を っ た. Have ら れ た PCR product に size standard を mixed ぜ て 4% ポ リ ア ク リ ア ル ア ミ ド ゲ ル electric 気 swimming を imposed し た (蛍 light DNA sequencer ABI377 を use). 4) each マ ー カ ー ご と に patients with bladder cancer DNA と peripheral blood DNA の 2 つ の allele の ピ ー ク areas (GeneScan) を calculation し た. Cancer DNA の reduce し た side の allele の ピ ー が ク area, peripheral blood DNA の ipsilateral allele の ピ ー に ク field comparative し て, below 50% と な る マ ー カ ー を common owe field loss (lossof heterozygosity; LOH) と し た. 5) Currently, 35 cases of bladder cancer are に, に, て検, て検 and である. D9S259 locusで で LOHが 6 out of 7 cases に recognize められた. D9S942 locusで で LOHが 5 out of 12 cases に recognize められた. In the ま だ be 験 で あ る が, 15 マ ー カ ー の う ち, 12 マ ー カ ー に お い て 1 cases above で LOH が 観 examine さ れ た. Future さ ら に LOH parsing を 続 け て, each マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト field で の LOH の 発 now と CDDP and radiation treatment の unseen fruit と の phase masato を beg す 検 る designated で あ る.