表皮欠損治療における培養表皮細胞および培養粘膜上皮の移植方法の検討

培养表皮细胞和培养粘膜上皮移植治疗表皮缺损方法的探讨

• 批准号: 12877325
• 负责人: 上田 実
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12877325/
• 关键词: 塗布型皮膚創傷治療剤; 潰瘍治癒促進; フィブリン糊; プロニック基材; ティッシュエンジニアリング; 再生医学; 培養皮膚; 人工皮膚; 潰瘍治療; 動物モデル; 移植基材; 培養粘膜上皮; 高分子化合物; 上皮欠損創; 移植方法; ゲル状基材; 培養表皮

今回の研究成果としては、培養上皮の作成方法および移植手技の簡略化を行い、本治療法全般の普及を目指した塗布型皮膚創傷治療剤の開発を行った。この目的を達するために2種類の細胞移植用基材について潰瘍治癒促進効果について検討した。現在までに有効性が確認されているフィブリン糊に加え、温度依存性に硬化するプロニック基材を用いた表皮細胞混合移植の効果を、潰瘍縮小率、肉眼型、HE、アザン染色による上皮化率、線維化率、治癒速度などの面から評価を行った。ヌードラット背部表皮に外科用8mmパンチを用い潰瘍を作り、それぞれの潰瘍部には、表皮細胞入り塗布型創傷被覆剤投与群、基材のみ、コントロール群の3群を作製し評価を行った。細胞入り治療剤投与後3日、6日、2週間後のラット潰瘍部を取り出し評価を行ったところ、表皮細胞入り投与群において、患部の早期収縮が見られ、上皮化率、線維化率においても良好な成績が得られた。移植基材選択や至適濃度の検討を行い、扱いやすさ、層への保持性からプロニック基材の有効性を明らかにし、またその時の基材における至適濃度を決定することができた。また、材料に混入する培養表皮細胞数の評価もあわせて行い、1×10^7個/mlの濃度が至適条件であることも明らかにした。フィブリン糊とプロニックの基材の違いによる大きな差異は見られなかったことより、温度硬化性を持ち、流れにくく、層への細胞の保持などの面から、プロニック基材の有効性を示すことができた。本研究の成果は今後のティッシュエンジニアリングによる生きた細胞の移植方法全般に影響を与え、臨床応用への示唆を含んでいると考える。さらに、他の組織においても同様の治療方法を開拓する可能性がある。今後、再生医学における塗布型治療剤の有用性について明らかにするとともに、実際に臨床で使えるようなパッケージング、調整方法の検討、簡略化を進めることにより臨床応用への示唆を示していきたい。

The results of this research are aimed at simplifying the preparation method of cultured epithelium and transplantation techniques, popularizing the whole treatment method, and developing coated skin wound treatment agents. To achieve this goal, two kinds of cell transplantation substrates are discussed. Now, we can confirm that there are some characteristics, such as the increase of epidermal paste, the temperature dependence of hardening, the effect of mixed epidermal cell transplantation on the substrate, the reduction rate of ulcer, the macroscopic type, HE staining, the epithelialization rate, the linear maintenance rate, the healing speed, and the surface evaluation. 8mm coating for back epidermis surgery. 3 groups of coating, substrate and coating for epidermis. 3 days, 6 days and 2 weeks after the administration of cell therapy, the ulcer part was extracted and evaluated, the epidermal cell was injected into the group, the early shrinkage of the affected part was observed, the epithelialization rate and the linear maintenance rate were excellent. The selection of the transplant substrate and the determination of the optimum concentration of the transplant substrate are discussed in detail. The number of cultured epidermal cells was evaluated at the concentration of 1×10^7 cells/ml. The difference between the temperature hardening property and the temperature hardening property of the substrate is large, and the cell retention property of the layer is large. The results of this study will have a general impact on the future development of cell transplantation and clinical application. In addition, there is a great possibility that other organizations can develop the same treatment methods. In the future, the usefulness of coated therapeutic agents in regenerative medicine will be clarified, and clinical applications will be discussed, adjustment methods will be discussed, simplification will be made, and clinical applications will be demonstrated.