低酸素培養による歯髄幹細胞の分画の選択培養とそのキャラクタライズ

低氧培养牙髓干细胞组分的选择性培养及其表征

基本信息

批准号：
19659525
负责人：
上田実
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

体性幹細胞は患者本人から採取可能な幹細胞であり、臨床への応用が期待されている。近年、歯髄内にも体性幹細胞が存在することが報告された。歯髄幹細胞は抜去歯牙から採取可能なため、有望な細胞源として注目を集めている。しかしながら、体性幹細胞の多くは分化傾向を持つ前駆細胞で構成されているため、その可塑性は限定的であり、今後高い可塑性を持つ優れた幹細胞分画の選択培養法の開発が望まれる。本研究は、低酸素培養法に着目して、歯髄培養細胞からの幹細胞分画の選択培養法の開発を目指すものである。幹細胞は組織が障害を受けたときに障害部位に遊走し、組織新生に重要な役割を果たすと考えられている。したがって、分化細胞や前駆細胞と比較して、幹細胞は低酸素・低栄養などの細胞障害刺激に耐性を持つものと推測される。低酸素・低栄養状態は、培養中の酸素濃度、グルコース濃度、血清濃度を変化させることによりin vitroで再現できることが報告されている。本研究期間中には、無酸素・低栄養状態で生存した細胞と、通常環境下における培養細胞とのキャラクターの違いについて検討を行なった。その結果、分化誘導を行っていない細胞では、無酸素・低栄養下で脱分化傾向を示し、ES細胞マーカーであるOct-4, Sox-2の発現が誘導された。また、無酸素・低栄養下で生存した細胞は、それ以外の環境で培養された細胞と比較して、高い分化誘導能を持つことが明らかとなった。以上から、低酸素・低栄養状態は歯髄由来細胞の生存には好ましく、また無酸素・低栄養環境下では、幹細胞マーカーの誘導と可塑性の高い細胞の選択が可能である可能性が示された。

体细胞是可以从患者自己的个体中收集的干细胞，预计将在临床上应用。近年来，据报道，纸浆中也存在体细胞。可以从提取的牙齿中收集牙髓干细胞，并吸引人们作为细胞细胞的有希望的来源。但是，由于大多数体细胞细胞由祖细胞组成，祖细胞具有分化的趋势，因此其可塑性是有限的，并且希望开发一种选择性培养方法，以用于将来具有高可塑性的优质干细胞馏分。这项研究的重点是缺氧培养方法，并旨在开发一种从浆中培养细胞的干细胞部分的选择性培养方法。当组织受损时，干细胞迁移到损伤部位，并被认为在组织再生中起重要作用。因此，与分化细胞和祖细胞相比，假定干细胞对细胞毒性刺激具有抵抗力，例如缺氧和营养不良。据报道，可以通过改变培养中的氧气浓度，葡萄糖浓度和血清浓度来在体外重现缺氧和营养不良。在本研究期间，我们检查了在正常情况下在缺氧和营养不良和培养细胞中存活的细胞之间的特征差异。结果，尚未诱导分化的细胞显示出在缺氧和营养低的情况下去分化的趋势，并且诱导ES细胞标记物OCT-4和SOX-2的表达。还揭示了在缺氧和低营养中幸存下来的细胞具有比在其他环境中培养的细胞更高的分化能力。从上述情况下，已经表明缺氧和低营养对于纸浆衍生的细胞的存活是可取的，并且在厌氧和低营养环境中，可以诱导干细胞标记物，并选择具有高可塑性的细胞。