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細胞融合法を用いた初期化と未分化状態の維持に関与する原因染色体の同定

使用细胞融合方法鉴定参与重编程和维持未分化状态的致病染色体

基本信息

批准号：
14654150
负责人：
白吉安昭
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度の研究により、F9テラトカルシノーマ細胞とES細胞との細胞融合によって、多分化能を示す雑種細胞株C4の分離に成功した。本年度は、C4の染色体構成の詳細な解析、ヒト染色体のES細胞への移入による機能解析、F9細胞とES細胞との共培養による分化能の解析、を中心に研究を進め、ES細胞の未分化性の分子基盤の解明を試みた。その結果、次のような成果を得ている。(1)C4の解析の結果、F9側の14番と19番染色体が脱落していることが明らかとなった。C4は、染色体を失うことによって分化能が回復したと考えられることから、これらの染色体上に分化抑制因子をコードする遺伝子が存在する可能性がある。今後さらに複数の細胞株を分離することによって、確認する予定である。(2)ヒト21番染色体を移入することによって、ES細胞の神経分化誘導過程において、アポトーシスが亢進することを明らかにし、マイクロアレイを用いてアポトーシスの誘導に関わる関連遺伝子の同定を試みた(Wang, et al., BBRC 314,335(2004))。(3)F9細胞とEs細胞とを共培養することにより、ES細胞の分化が抑制されることを見出した。これは、トランスウェルなどのメンブレンで両者を隔てても分化抑制が見られることから、F9細胞がES細胞の未分化性を保つ働きを持つ因子を分泌していることを示唆している。LIFなどの既存のES細胞分化抑制因子の発現が見られないことから、F9細胞は新規の分化抑制因子を産生していることが考えられる。これらの結果から、ES細胞の未分化性維持に関わる新規分泌型因子の存在を明らかにでき、多能性に関わる染色体候補としてマウス14番、19番染色体を同定することができた。

In the previous year, ES cell fusion and multi-differentiation can show the successful isolation of several kinds of cell lines. This year, the chromosome formation of chromosome C4 was analyzed, the transfer of ES cells into cells was analyzed, the differentiation energy of F9 cells ES cells co-cultured was analyzed, the central study was conducted, and the molecular basis of undifferentiated ES cells was explained. The results of the results and the results of the secondary results were satisfactory. The main results are as follows: (1) the results of C4 analysis, F9 chromosome exfoliation and chromosome exfoliation were analyzed in 14 and 19 times. There is a possibility that there is a possibility of differentiation on the chromosomes of C4, chromosome, chromosome, and chromosome. In the future, the cell lines will be isolated from each other, and confirm that the cell lines will be predetermined. (2) the chromosomes were transferred into ES cells in the same way (Wang, et al., BBRC 314335 (2004)). The results showed that the chromosomes were transferred to the host cells in the first place. (3) F9 cells, Es cells, co-culture cells, ES cells, cell differentiation, inhibition, differentiation, differentiation and differentiation. The undifferentiated cells of F9 cells, ES cells, undifferentiated cells, secreted factors, secreted factors, expressed instillation factors. LIF cell differentiation inhibitor (ES), cell differentiation inhibitor (F9), cell differentiation inhibitor (F9). The results showed that the undifferentiated maintenance of ES cells and the presence of novel secretory factors, pluripotent genes and chromosome phenotypes were detected in 14 and 19 times respectively.