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リポソーム内タンパク質合成による自立的膜融合

通过脂质体内蛋白质合成进行自主膜融合

基本信息

批准号：
15657035
负责人：
四方哲也
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

始原細胞の膜融合による捕食の可能性について、実験的にアプローチした。具体的には、エサとなるリポソームと捕食するリポソームを用意する。捕食するリポソームには融合タンパク質であるメリチンの遺伝子と無細胞タンパク質合成系を封入しておく。エサとなるリポソームにはATPなどを封入しておく。この二つのリポソームを混ぜると、捕食するリポソーム内でメリチンが合成され、それによって回りに浮かんでいるエサのリポソームを融合する。その結果、エネルギーが供給され、さらにタンパク質合成が促進されると考えられる。タンパク質合成を行うリポソームは高塩濃度に耐性を持たせるために特殊な脂質組成である。とくにポリエチレングリコールと脂質分子が共有結合した複合体を用いて、リポソーム表面を守る必要がある。そこで、このような特殊なリポソームに対して、メリチンが融合活性を示すかどうかを検討した。緑色蛍光タンパク質GFPを封入したリポソームと赤色蛍光タンパク質RFPを封入したリポソームとの混合液をセルソータで解析したところ、それぞれのリポソームがはっきり分かれて観察された。そこにメリチンを外部から加えたところ、二つのリポソームの中間に緑と赤の両方の蛍光を持つリポソームがはっきり確認された。この中間の領域を分画して顕微鏡観察すると、2種類のリポソームが単にくっ付いているのではなく、融合して二つの蛍光を示すリポソームが確認された。以上の結果より、メリチンがタンパク質合成を行うリポソームの融合にも有効であることがわかった。一方、リポソーム内でタンパク質合成を行うベクターも構築した。これにより、メリチンを合成するリポソームによるエサのリポソームの捕食実験が可能となった。

The membrane fusion of protocells may lead to predation. The specific purpose of the solution is to provide a solution to the problem of predation. Predator: The fusion protein is encapsulated in the cell-free protein synthesis system. The best way to do this is to close the door. The two groups are mixed, and the two groups are combined. As a result of this, the production of new materials is being promoted. A special lipid composition is required for the synthesis of lipids. The lipid molecules are bound together in a common way, and the lipid molecules are bound together in a common way This is a special case. Green and red fluorescent dyes are encapsulated in a mixture of fluorescent dyes. In the middle of the room, the green and red lights are displayed. The intermediate domain is divided into two categories: microscopical observation, identification, and fusion. The above results show that there is a difference between the quality synthesis and the quality synthesis. A party, a group of people, a group of people The combination of these two technologies may result in a large number of problems.