好熱菌由来のカタラーゼIの高活性型から低活性型への転移現象

嗜热菌来源的过氧化氢酶I从高活性型向低活性型的转变现象

• 批准号: 10878112
• 负责人: 四方 哲也
• 金额: --
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10878112/
• 关键词: カタラーゼ; 進化工学

野生型のカタラーゼ1について幾つかの測定を行った。活性型の変化に伴った構造の変化を捕らえようとしたが、その差が小さく、構造の直接測定は困難を極めた。そこで、活性型転移による構造変化の大きい変異体作成のために、ランダム伸長変異法を用いた。ランダム伸長変異法は進化工学的方法である。工学的に酵素を改良するといずれ頭打ちとなる。また、自然界で良く最適化が進んだ酵素はそれ以上改良することが難しい。これらは対象となる酵素が配列空間上の山の頂上付近に位置するからである。この一般的な問題点をランダム伸長変異で解決できることを示した。カタラーゼのC末に付加したランダム伸長変異ではランダム点変異に比べて、高い熱安定性の変異体は10倍の頻度で得られた。伸長変異を加えると、配列空間の次元が増え、新たな改良の余地が与えられる。このようにして得られたカタラーゼの集団は活性でも多様性に富んだものであった。また、問題となる活性型の転移現象の程度にもかなりの幅が存在した。このことは前に示された二つの活性型の存在がアミノ酸配列に依存する現象であることが分かった。

The wild type has been tested to determine the number of lines. The active type of chemical reaction is accompanied by the production of high temperature, low temperature and high temperature. The mass transfer method and the active transfer method are used to make the large metal body into the steel plate, and the elongation method is suitable for use. It is necessary to extend the method of improving chemical engineering. The enzyme of engineering is used to improve the quality of food. The best in nature is the improvement of enzymes and enzymes. For example, the location of the enzyme in the space is close to the location on the mountain. The general problem point is to increase the length of the solution and to show you. At the end of the day, it is necessary to increase the temperature, the temperature and the temperature. Expand the number of units, allocate space dimensions, new ones, room for improvement and transportation. I don't know what to do. I don't know. I don't know what to do. The problem is that there is a difference in the size of the active image. The front screen shows that there is a dependence on the acid configuration of the active type.

项目成果

Matsuura,T.et al.: "Evolutionary Molecular Engineering by Random Elongation Mutagensis" Nature Biotechnology. 17. 58-61 (1999)

Matsuura,T.et al.：“随机延伸诱变的进化分子工程”自然生物技术。