分子生物学的手法による魚卵・仔魚捕食者の特定と初期減耗研究への試行的適用

利用分子生物学方法识别鱼卵和幼虫的捕食者并在早期损耗研究中试用

• 批准号: 15658058
• 负责人: 中山 耕至
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15658058/
• 关键词: 魚卵・仔魚; 被食; 初期減耗; ミズクラゲ; ミトコンドリアDNA; カタクチイワシ; マダイ; マアジ; スズキ; PCR

1.被食仔魚DNA検出用プライマーの作成昨年までに作成したミトコンドリアDNA調節領域,16Sリボゾーム領域に加え,新たにシトクロームB領域に被食仔魚検出用のPCRプライマーを作成した.様々なDNA濃度において増幅検出試験を行ったところシトクロームBプライマーにおいてもっとも高感度の検出結果が得られたため,以下の分析においてはこの手法を用いた.2.ミズクラゲによるカタクチイワシ仔魚消化時間の推定ミズクラゲを個別に小型飼育容器に収容し,カタクチイワシ仔魚1個体を与えて消化されるまでの時間を測定した.18℃と25℃の2水温区を設け,平均傘径101.1mmのミズクラゲおよび平均体長20.1mmのカタクチイワシを用いた.両水温区ともに,捕食されたカタクチイワシ仔魚は3時間後には形態的には同定不可能なほどに消化され,6時間後には肉眼および実体顕微鏡下での確認が困難となった.しかし,胃腔の内容物からDNA増幅を試みたところ,18℃区では6時間後までの全個体で,25℃区では1個体を除く全ての個体で捕食されたカタクチイワシのDNAが検出され,本手法の有効性が確認された.3.天然海域で採集されたミズクラゲからの被食仔魚DNA検出2005年4月から9月にかけ,若狭湾西部の栗田および舞鶴湾内の2定点において1-2回/月の頻度でミズクラゲの採集を行った.ネット内部での受動的な卵・仔魚捕食を避けるため,採集には目合い3mmのネットを用いた.採集されたミズクラゲは,船上において傘径を計測するとともに胃腔を切り出しエタノール中に保存した.1定点での採集数が多すぎる場合は無作為に一部を取り出してサンプルとし,8回の調査から計61個体(平均傘径127.6mm)のミズクラゲが得られた.そのうち46個体の胃腔内容物から粗DNAを抽出しPCR法を行ったところ,7個体から魚類由来のDNAが検出され,その多くはカタクチイワシと推定された.

1. The DNA was used to make the food last year. Last year, it was made into the field of the DNA. The field of the 16-year-old was increased. The new area of the food was made by the PCR. The results showed that the results showed that the results It is estimated that the digestion time of the baby, the temperature, the digestion, the temperature, the average diameter, the average body length, the average body length, the temperature, the temperature, the temperature In the temperature zone of the water, it is impossible to digest the fish after 3: 00, and confirm that it is difficult to do so after 6: 00 in the water temperature zone. The contents of the stomach cavity, the contents of the stomach, the DNA, the contents of the stomach, the contents of the The natural sea area is full of food, DNA, April, September, 2005, April and September, 2005. The eggs that are affected by the fish inside the fish prey on the prey and avoid the fish, and the fish are collected to meet the needs of the 3mm fish. The ship was divided into two groups, and the ship was divided into two parts. 1. The number of fixed-point equipment sets was not used as one, and the average diameter of 61 bodies (average diameter 127.6mm) was measured in 8 cycles. The contents of the gastric cavity in 46 cases were extracted by DNA. The PCR method was used to determine the origin of the gastric contents. In 7 cases, the cause of the disease was detected by DNA, and the presumption was not found.