プリオン/アミロイド型蛋白質凝集の生細胞系での解析・評価システムの開発

开发活细胞系统中朊病毒/淀粉样蛋白聚集体的分析和评估系统

• 批准号: 15659050
• 负责人: 今野 卓
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: University of Fukui (2004)福井医科大学 (2003)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659050/
• 关键词: 蛋白質凝集; アミロイド; プリオン; 変性疾患; 酵母プリオン; アミロイ性凝集; 細胞内凝集; 凝集センサー; 蛍光性蛋白質; トランスグルタミナーゼ

本研究では、生細胞内におけるプリオン/アミロイド性凝集の諸過程を解析し、それを制御する因子を明らかにするために、以下1)と2)に大別される実験的アプローチと、その両者の有機的融合を目指した。1)生細胞内におけるプリオン/アミロイド性凝集の精確な観測・解析システムの開発2)生細胞環境を再現する試験管実験系の構築と、そこでのプリオン/アミロイド性凝集の解析前者1)については、似下の2者の開発をはかり、それを実現した。1)-(1)複数種類のプリオン/アミロイド性凝集性蛋白質の酵母細胞内凝集を同時に蛍光法で観察するシステム1)-(2)これら細胞内凝集体の微細構造の変化をFRET法で感知するセンシング法他方、2)については、2)-(1)凝集体の微細構造を非定形態から繊維状形態に変化させる溶液因子としてのイオン性因子の役割2)-(2)酵素修飾が蛋白質凝集を制御する典型的な場合としてのトランスグルタミナーゼ修飾の詳細2)-(3)繊維状凝集体に特徴的なβシート構造形成の分子ダイナミクスなどを解明した。以上ついては、既に論文5報の公表を終えている(文献参照)。現在は、1)と2)それぞれの一層の進展・一般化をはかると共に、他方ではその両者を融合させるために、酵母プリオン系と1)-(2)で開発したセンサーを利用した発展的研究を実施中である。本予算期間終了後も、以上の成果に基づき、細胞内凝集の直接解析に関する1研究領域を確立する努力を継続する。

The purpose of this study is to analyze the process of bacterial agglutination, control factors, and the following 1) 2) in this study, we analyzed the process of bacterial agglutination in this study, and the following 1) 2) in this study, we analyzed the process of bacterial agglutination and control factors in this study. 1) Intracelluar cytopathic hemagglutination assay is accurate and accurate. 2) Recombinant cytosolic cell environment is reappeared. The former is analyzed by microcytopathic agglutination assay, which is similar to that of the other two. 1)-(1) multiplicative and multiplicative agglutinative proteins were detected by yeast intracellular agglutination assay and simultaneous photoluminescence analysis. (1)-(2) intracellular agglutination was detected by fluorescence microscopy. (1)-(1)-(1)-(1)-(1)-(1)-(1)-(1)-(1)-(1)-(1)-(1)-(1)-(1)-- (1)-- (1)-- (1)-(1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-- (1)-(1)-(1)-(1) 2)-(1) condensate microfabrication, non-stereotyped agglutination, conformation modification, solution factor, solution factor, protein agglutination, agglutination and control. (2)-(2) (2) (2)-(1) agglutination of protein to control the formation of a typical condensate. To make a molecular understanding. The above articles and articles 5 are reported in the public form (reference to literature). Now, 1) 2) in the first place, we are in the process of generalizing the general information system, the integration of other parties, and the yeast system. (1)-(2) the research on the use of the exhibition is in progress. After the completion of this calculation period, the above "results" and "intracellular agglutination" are analyzed directly in the field of research.