マラリアの長期免疫記憶に関する分子細胞学的機序の解明

阐明疟疾长期免疫记忆的分子和细胞学机制

• 批准号: 15659100
• 负责人: 鈴木 守
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659100/
• 关键词: immune memory; malaria vaccine; Plasmodium berghei XAT; adoptive transfer; adaptive immunity; protective immunity; Rag-2 knockout mouse; murine malaria

群馬大学の脇・鈴木らは、1個の原虫接種でマウスに致死性を示すPlasmodium berghei強毒株NK65株に放射線照射を施し、弱毒株P.berghei XAT株を作製した。この原虫をマウスに多量に接種してもマウスは生存し、そのマウスには6ヶ月以上にわたって免疫記憶が成立することから、得られた弱毒株はまさにネズミにおける弱毒マラリアワクチン株である。この系では非常に安定した明白な実験結果が得られるので、マラリアの免疫研究に最も適している。平成14年度より当該研究費により、弱毒株P.berghei XAT株で生じる免疫記憶細胞の維持機構について検討を加えた。まず免疫記憶の維持はマウス体内における原虫の持続感染によるものなのかどうかについて調べた。感染から6ヶ月間にわたって(まだ免疫記憶を保持している)一週間ごとに末梢血を採取し、薄層塗末標本中の原虫の有無を観察したところ、感染から1ヶ月以上経過したマウスからは全く原虫が観察されなかった。次に感染から2ヶ月経過したマウスの脾臓を摘出し、ウェスタンブロット法及びPCR法により原虫の存在を調べたところ、いずれの方法においても原虫抗原、原虫DNAは観察出来なかった。その脾臓細胞をRag-2^<-/->マウス(T、B細胞を欠損)に移入してからさらに2ヶ月間飼育した後、強毒NK65株を感染させるとマウスは原虫の増殖を抑制した。またXAT株感染後抗マラリア薬を投与しても、免疫記憶の保持に影響しなかった。以上のことから、免疫記憶の保持には原虫の存在及び原虫抗原の存在は必要がないことが示唆された。また細胞標識によって分裂回数をモニターする試薬であるCFSEを使用した実験においては、移入した免疫記憶細胞(CFSE標識細胞)で特に分裂回数の多いものは観察されなかった。この事から、免疫記憶細胞は繰り返し分裂することによって保持されるのではなく、細胞が長期間生存し続けることによって免疫記憶が維持されることが示唆された。今後どのような分子によって防御免疫及び免疫記憶がになわれているのかについて、追究しているところである。

Group from の danger, suzuki ら は, 1 の protozoa inoculation で マ ウ ス に deadly を shown す Plasmodium berghei virulent strain NK65 strains に radiation を し, weak strain P.b erghei XAT strains を cropping し た. こ の parasite を マ ウ ス に に abundant vaccination し て も マ ウ ス は survival し, そ の マ ウ ス に は ヶ 6 months above に わ た っ て immune memory が established す る こ と か ら, ら れ た weak strain は ま さ に ネ ズ ミ に お け る weak poison マ ラ リ ア ワ ク チ ン strains で あ る. こ の is で は very に settle し た understand な be the result of 験 が ら れ る の で, マ ラ リ ア の immune research に most も し て い る. In the Heisei 14 fiscal year, よ えた was allocated to the research fund によ えた, the attenuated strain P. burghei XAT strain で, the じる immune memory cell <s:1> maintenance institution に, に, て検 and て検 for を and えた. ま ず immune memory の maintain は マ ウ ス body に お け る parasite の hold 続 infection に よ る も の な の か ど う か に つ い て adjustable べ た. Infection か ら ヶ six months between に わ た っ て (ま だ immune memory を keep し て い る) a week between ご と を に peripheral blood by し, at the end of the thin layer coating specimen の parasite の presence of を 観 examine し た と こ ろ, infection か ら over 1 ヶ month 経 し た マ ウ ス か ら は full く parasite が 観 examine さ れ な か っ た. Time に infection か ら 経 ヶ 2 month before し た マ ウ ス の splenic を pick out し, ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト method and び PCR method に よ り parasite の is を adjustable べ た と こ ろ, い ず れ の way に お い て も parasite antigen, parasite DNA は 観 was found out な か っ た. そ の splenic cells を Rag - 2 ^ < - / - > マ ウ ス (T, B cells を owe damage) に move し て か ら さ ら に ヶ 2 months rearing し た, strong poison NK65 strains を infection after さ せ る と マ ウ ス は parasite の raised colonization を inhibit し た. After またXAT strain infection, the administration of anti<s:1> ラリア drugs を has an に effect on <s:1> て <e:1> and the maintenance of immune memory に, as well as on <s:1> な った った った った. The above <s:1> された と ら ら ら ら, the immune memory <e:1> maintains the existence of に protozoan <e:1> and the existence of び protozoan antigen <s:1> is <s:1> necessary がな <s:1> とが とが とが とが とが とが とが suggesting された. ま た cell identification に よ っ て split back several を モ ニ タ ー す る try 薬 で あ る CFSE を use し た be 験 に お い て は, moving し た immune memory cells (CFSE logo cells) で に split back to more than several の い も の は 観 examine さ れ な か っ た. こ の matter か ら, immune memory cells は Qiao り return し split す る こ と に よ っ て keep さ れ る の で は な く, cell が long-term survival between し 続 け る こ と に よ っ て immune memory が maintain さ れ る こ と が in stopping さ れ た. The future ど の よ う な molecular に よ っ て び defense immune and immune memory が に な わ れ て い る の か に つ い て, shall be investigated for し て い る と こ ろ で あ る.

项目成果

Yamauchi T, … Koyasu S(26人中21番目), et al.: "Cloning of adiponectin receptors that mediate antidiabetic metabolic effects."Nature. 423(6941). 762-769 (2003)

Yamauchi T，… Koyasu S（26 日第 21 日）等人：“介导抗糖尿病代谢作用的脂联素受体的克隆”。《自然》423（6941）。

Suzue K, Asai T, Takeuchi T, Koyasu S: "In vivo role of innate immunity of IFN-γ from antigen presenting cells."European Journal of Immunology. 33. 2666-2675 (2003)

Suzue K、Asai T、Takeuchi T、Koyasu S：“来自抗原呈递细胞的 IFN-γ 先天免疫的体内作用。”欧洲免疫学杂志 33. 2666-2675 (2003)。

Toyama-Sorimachi N, … Koyasu S(8人中6番目), et al.: "Ly49Q, a member of family that is selectively expressed on myeloid lineage cells and involved in regulation of cytoskeletal architecture."Proceedings of the National Academy of Science U S A. 101(4). 1016-1

Toyama-Sorimachi N，… Koyasu S（8 中的第 6 名）等人：“Ly49Q，是在骨髓谱系细胞上选择性表达并参与细胞骨架结构调节的家族成员。”美国国家科学院院刊答：101(4)。

Taguchi N, Hatabu T, Yamaguchi H, Suzuki M, Sato K, Kano S.: "Plasmodium falciparum : selenium-induced cytotoxicity to P.falciparum."Experimental Parasitology. 106(1-2). 62-65 (2004)

Taguchi N、Hatabu T、Yamaguchi H、Suzuki M、Sato K、Kano S.：“恶性疟原虫：硒诱导的恶性疟原虫细胞毒性。”实验寄生虫学。

Katakura K, Fujise H, Takeda K, Kaneko O, Torii M, Suzuki M, et al.: "Overexpression of LaMDR2, a novel multidrug resistance ATP-binding cassette transporter, causes 5-fluorouracil resistance in Leishmania amazonensis."FEBS Letter. 561(1-3). 207-212 (2004

Katakura K、Fujise H、Takeda K、Kaneko O、Torii M、Suzuki M 等人：“LaMDR2（一种新型多药耐药性 ATP 结合盒转运蛋白）的过度表达，导致亚马逊利什曼原虫产生 5-氟尿嘧啶耐药性。”FEBS 信函。