トランスポーターを応用したインテリジェントDDSによる癌分子標的治療

使用转运蛋白的智能 DDS 进行癌症分子靶向治疗

• 批准号: 15659308
• 负责人: 柳衛 宏宣
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659308/
• 关键词: Drug Delivery System; アニオン性PEG誘導体; ポリエチレンイミン; JTS-1; DNAマイクロアレイ; トランスポーター; 抗癌剤耐性遺伝子; 分子標的治療; DDS

ポリカチオンを用いた遺伝子導入において、通常の条件ではDNAとポリカチオンとの複合体がプラスに帯電し、血清タンパクと大きな凝集塊を作ることなどが、in vivoの遺伝子治療に向けて問題となっている。プロトンスポンジ効果を持つポリエチレンイミンを用い、血清蛋白との凝集を阻止するカルボキシル側鎖を持つアニオン性PEG誘導体(PEG-C)を用いて複合体の表面をコートし新規ポリイオン複合体を形成した。この複合体にpH依存性膜融合ペプチドJTS-1とLactose修飾PEG-Cを用い6x10E9 RLU/mg proteinまで発現効率を高め得た。さらに膵臓癌担癌マウスにおいて腫瘍内局注にてβ-gal遺伝子の発現増加を認めた。またJTS-1/pDNA/TF-PLL複合体では、TFレセプターを介したエンドサイトーシスにより細胞内に取り込まれ、エンドゾーム内でTFとPLLのジスルフィド結合が切れ、JTS-1のエンドゾーム膜融合破壊により複合体が効率よく放出された結果、核への移行量が高まり発現が上昇したと考えられた。オキサリプラチンおよびシスプラチン耐性癌細胞および非耐性癌細胞株を用いたDNAマイクロアレイの解析結果より、Tubrin特異的シャペロンEおよびCBP/P300-Interacting Transactivator(CITED2)遺伝子の増幅を認めた。これらの遺伝子に対するsiRNAを用いてノックダウン法を行うと耐性癌細胞株において細胞障害効果の増強を認めた。このことは、上記遺伝子が薬剤耐性遺伝子であることの証明となった。トランスポーター遺伝子の解析により、PEPT1、OCTN1などの遺伝子が同定され、PEPT1はβラクタム抗生物質、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、抗癌剤であるベスタチンの小腸粘膜の吸収に関係し、OCTN1はpH依存性の陽荷電分子の移動に関係することが解った。

ポ リ カ チ オ ン を with い た posthumous son 伝 import に お い て, usually の condition で は DNA と ポ リ カ チ オ ン と の complex が プ ラ ス に 帯 し, serum タ ン パ ク と big き な agglutination block を as る こ と な ど が, the in vivo の heritage 伝 に son treatment to け て problem と な っ て い る. プ ロ ト ン ス ポ ン ジ unseen fruit を hold つ ポ リ エ チ レ ン イ ミ ン を い, serum protein と の agglutination を stop す る カ ル ボ キ シ ル side chain を hold つ ア ニ オ ン sex PEG inductor (PEG - C) を with い て complex の surface を コ ー ト し new rules ポ リ イ オ ン complex を form し た. The <s:1> <s:1> complex に ph-dependent membrane fusion ペプチドJTS-1とLactose modification PEG-Cを with <s:1> 6x10E9 RLU/mg proteinまで has a を high め effect on た. Youdaoplaceholder0 pancreatic cancer, ウスにお ウスにお て て, local injection of にてβ-gal in abscesses, 伝 offspring, 伝 occurrence and increase, を recognition, めた. ま た JTS - 1 / pDNA/TF - PLL complex で は, TF レ セ プ タ ー を interface し た エ ン ド サ イ ト ー シ ス に よ り intracellular に take り 込 ま れ, エ ン ド ゾ ー ム で TF と in PLL の ジ ス ル フ ィ ド combining が れ, JTS 1 の エ ン ド ゾ ー ム membrane fusion broken 壊 に よ り complex が sharper rate よ く release さ れ た results Nuclear へ <s:1> migration amount が is high ま ま へ occurrence が increase たと たと test えられた. オ キ サ リ プ ラ チ ン お よ び シ ス プ ラ チ ン patience cancer お よ び を not patience cancer cells with い た DNA マ イ ク ロ ア レ イ の analytical results よ り, Tubrin specific シ ャ ペ ロ ン E お よ び CBP/P300 - Interacting Transactivator(CITED2) retains 伝 sub-<s:1> increase を recognize めた. こ れ ら の posthumous son 伝 に す seaborne る siRNA を with い て ノ ッ ク ダ ウ ン line method を う と patience cancer cells に お い て cells handicap of unseen fruit の raised strong を recognize め た. Proof of <s:1> <s:1> と, the previous record 伝 child が drug resistance child 伝 child である と と と となった となった. ト ラ ン ス ポ ー タ ー posthumous son 伝 の parsing に よ り, PEPT1, OCTN1 な ど の posthumous son 伝 が with fixed さ れ, PEPT1 は beta ラ ク タ ム antibiotic substances, ア ン ギ オ テ ン シ ン planning in enzyme inhibitor against tonic, anticancer tonic で あ る ベ ス タ チ ン の intestinal mucosa の 収 absorption に masato し, OCTN1 は pH dependency の Yang charged molecules move の に masato Youdaoplaceholder0 する とが solve った.

项目成果

Kazuo Maruyama: "Intracellular targeting of sodium mercaptoundecahydrododecaborate (BHS) to solid tumors by transferring-PEG liposomes, for boron neutron-capture therapy (BNCT)"J.Control.Release. (in press). (2004)

Kazuo Maruyama：“通过转移 PEG 脂质体将巯基十一氢十二硼酸钠 (BHS) 细胞内靶向实体瘤，用于硼中子捕获疗法 (BNCT)”J.Control.Release。

Intracellular targeting of sodium mercaptoundecahydrododecaborate(BSH)to solid tumors by transferring-PEG liposomes, for boron neutron-capture therapy (BNCT)

通过转移 PEG 脂质体将巯基十一氢十二硼酸钠 (BSH) 细胞内靶向实体瘤，用于硼中子俘获疗法 (BNCT)

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Control.Release Vol.98 No.2
• 作者: Hironobu Yanagie;Kazuo Maruyama
• 通讯作者: Kazuo Maruyama

Accumulation of boron compounds to tumor with polyethylene-glycol binding liposome by using neutron capture autoradiography.

• DOI: 10.1016/j.apradiso.2004.03.109
• 发表时间: 2004-10
• 期刊: Applied radiation and isotopes : including data, instrumentation and methods for use in agriculture, industry and medicine
• 作者: H. Yanagië;K. Ogura;K. Takagi;K. Maruyama;T. Matsumoto;Y. Sakurai;J. Skvarc;Radomir Illic;G. Kuhne;T. Hisa;I. Yoshizaki;K. Kono;Y. Furuya;H. Sugiyama;H. Kobayashi;K. Ono;K. Nakagawa;M. Eriguchi

Hironobu Yanagie: "Choronotherapy for cancer."Biomed Pharmacother. 57. 92-95 (2003)

Hironobu Yanagie：“癌症的脉络膜疗法。”Biomed Pharmacother。

Ikumi Tamai: "Involvement of OCTN1(SLC22A4) in pH-Dependent Transport of Organic Cation"Molecular Phamaceutics. Vol.1・No.1. 55-66 (2003)

玉井育美：“OCTN1（SLC22A4）参与 pH 依赖性有机阳离子运输”《分子药剂学》第 1 卷·第 1 期（2003 年）。