遺伝子欠損顆粒膜細胞を用いた重症排卵障害および黄体化異常の治療法の発見

发现使用基因缺陷颗粒细胞治疗严重排卵障碍和黄素化异常的方法

• 批准号: 15659398
• 负责人: 田中 哲二
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659398/
• 关键词: 顆粒膜細胞; 排卵障害; 卵巣機能障害; 黄体化障害; C; EBP-beta; アポトーシス; Topoisomerase I inhibitor; 黄体化

昨年度に抗癌剤の卵巣顆粒膜障害を検証するために卵巣組織切片器官培養法の確立に世界で初めて成功した。本実験法確立は機能的細胞群単位での卵巣機能解析を可能にした画期的開発であった。そこで、今年度は当初細胞培養実験で計画していた解析を可能な限りこの器官培養法で行う方向に変更した。当初計画していた単細胞培養系よりもはるかに簡便にin vivo卵巣機能を反映できると考えられたからである。また、我々はTopoisomerase inhibitorが卵巣顆粒膜細胞に分化特異的成熟度特異的アポトーシスを誘発することを世界で初めて証明した。このアポトーシスのメカニズムを明らかにし、予防方法を発見できれば、重症排卵障害や早発閉経患者の新しい治療法を開発できることから、このアポトーシス研究を取り入れた。予定された各種実験は継続しているが、多くは結論的な結果はまだ得られていない。しかし、Topoisomerase inhibitorによる卵巣顆粒膜細胞障害については新発見に成功した。この卵巣顆粒膜細胞障害の分子機序の解明と、治療法の発見は、当初の本研究の最終目的と同じ結果が得られることになった。卵巣組織切片器官培養による顆粒膜細胞機能のin vitro解析実験系で、Topoisomerase inhibitorによる卵巣顆粒膜細胞アポトーシスが、CPT-11でもSN38でもない第3の未知の物質により誘発されていること、卵巣顆粒膜細胞の毒物代謝機構が特異的なために、若年の卵巣機能障害発症に関与する可能性を発見した(論文執筆中)。動物実験で、Topoisomerase inhibitorによる卵巣顆粒膜細胞アポトーシスをGnRHaによる卵巣休眠療法で確実に予防することし成功した。さらに、アポトーシス制御分子のノックアウトマウスを使った実験から、Topoisomerase inhibitorによる卵巣顆粒膜細胞の分化特異的成熟度特異的アポトーシスを完全に阻止することに成功した(論文執筆中)。現在は臨床応用のための条件を決定している最中である。別の並行実験から、activinシグナルやDNA methylationが卵巣機能障害に関与している可能性も発見した。

Last year, the に anti-cancer drug oocyte granular membrane obstruction を検 syndrome するために oocyte tissue section organ culture method <e:1> established the に world で initial めて success た た. This experimental method was used to establish the 単 functional cell population of で and で the functional analysis of <s:1> oocytes を possible に <s:1> た periods of development であった. そ こ で, our は "original cell culture be 験 で project し て い た parsing を may な limits り こ の organ culture method line で に う direction - more し た. Original plan し て い た 単 cell culture system よ り も は る か に simple に 巣 function in vivo eggs を reflect で き る と exam え ら れ た か ら で あ る. ま た, I 々 は Topoisomerase inhibitor が eggs 巣 particles membrane cells に specific maturity specific ア ポ ト ー シ ス を 発 lure す る こ と を め the early で て prove し た. こ の ア ポ ト ー シ ス の メ カ ニ ズ ム を Ming ら か に し method, to prevent を 発 see で き れ ば, severe ovulation handicap of patients with や 発 経 closed early の new し い therapy を open 発 で き る こ と か ら, こ の ア ポ ト ー シ ス research を take り れ た. Various be designated さ れ た 験 は 継 続 し て い る が, multiple く は conclusion な results は ま だ must ら れ て い な い. <s:1> に, Topoisomerase inhibitorによる oocyte granulosa membrane cell obstruction に て て て に new discovery に success た た. こ の eggs 巣 handicap of granule membrane cells の molecular machine sequence の interpret と, therapy の 発 は, original の aim this study の と with the result of じ が ら れ る こ と に な っ た. Oocyte tissue section organ culture による granulosa cell function による in vitro analytical laboratory で, Topoisomerase Inhibitor に よ る eggs 巣 granular cell membrane ア ポ ト ー シ ス が, CPT - 11 で も SN38 で も な の い の 3 unknown matter に よ り 発 lure さ れ て い る こ と の poisons metabolism, egg 巣 particles membrane cells institutions が specific な た め に, if years の egg 巣 functional handicap of 発 disease に masato and す る possibility を 発 see し た (paper) in written. Animals be 験 で, Topoisomerase inhibitor に よ る eggs 巣 granular cell membrane ア ポ ト ー シ ス を GnRHa に よ る eggs 巣 dormancy therapy で indeed be に to prevent す る こ と し successful し た. さ ら に, ア ポ ト ー シ ス system royal molecular の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を make っ た be 験 か ら, Topoisomerase inhibitor に よ る eggs 巣 particles membrane cells の specific maturity specific ア ポ ト ー シ ス を に completely prevent す る こ と に successful し た (paper) in written. Now, in 応 clinical practice 応, the <s:1> ため ため <s:1> condition を is used to determine the <s:1> て る る る is the most appropriate である. The parallel experiments of て ら, activinシグナ や や, DNA methylationが, and the possibility of <s:1> て る る る る に of ovarian dysfunction に were found to be た.

项目成果

Topoisomerase I inhibitorによる卵巣顆粒膜障害の発生機序

拓扑异构酶I抑制剂引起卵巢颗粒层损伤的机制

• 发表时间: 2005
• 期刊: 日本受精着床学会雑誌 22(印刷中)
• 作者: 宇都宮智子;田中哲二;ほか
• 通讯作者: ほか

Topoisomerase I inhibitorによる卵巣機能障害の臨床および基礎的研究

拓扑异构酶I抑制剂所致卵巢功能障碍的临床与基础研究

• 发表时间: 2004
• 期刊: 日本受精着床学会雑誌 21
• 作者: 宇都宮智子;田中哲二;ほか
• 通讯作者: ほか

宇都宮智子, 田中哲二, ほか: "Topoisomerase I inhibitorによる卵巣機能障害の臨床および基礎的研究"日本受精着床学会雑誌. 21(印刷中). (2004)

Tomoko Utsunomiya、Tetsuji Tanaka 等：“拓扑异构酶 I 抑制剂引起的卵巢功能障碍的临床和基础研究”日本受精与植入学会杂志 21（出版中）。

ヒト子宮内膜細胞in vitro培養系を用いたdanazol局所投与療法の作用機序に関する検討

人子宫内膜细胞体外培养系统局部达那唑治疗的作用机制研究

• 发表时间: 2004
• 期刊: 日本受精着床学会雑誌 21
• 作者: 田中哲二;宇都宮智子;ほか
• 通讯作者: ほか

Growth-inhibitory signals by activin A do not affect anticancer drug-sensitivity and acquired multi-drug-resistance in human ovarian endometrioid adenocarcinoma OVK-18 cells.

激活素 A 的生长抑制信号不影响人卵巢子宫内膜样腺癌 OVK-18 细胞的抗癌药物敏感性和获得性多重耐药性。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Oncology Reports 11
• 作者: Tanaka T;Toujima S;et al.
• 通讯作者: et al.