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カイコ培養細胞に慢性感染する新種のRNAウイルス

一种可长期感染培养蚕细胞的新型RNA病毒

基本信息

批准号：
16658023
负责人：
嶋田透
金额：
$ 2.3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

1.新しいウイルスBmMLVの複製機構の解析昨年度ゲノムRNAの構造を決定した結果,新しいウイルスBmMLVのゲノムおよびサブゲノミックRNAの構造は明らかになったが,ウイルスの複製機構はそれらの構造のみでは分からない。BmN細胞には,BmMLVの5'末端配列が繰り返すような構造の奇妙なRNAが大量に存在する。今年度は,BmMLVの複製機構のヒントを得るために,その反復配列RNAの構造を解析した。その結果,CAAAGTCAGC・・・・・・CAAGCTCATGという175塩基からなるユニットが少なくとも3回反復する点で共通していた。しかし,このRNAがウイルスの複製にどのように関与するのか,まだ不明である。2.ウイルスの由来に関する問題クワが,ウイルスの起源として推定されるので,東大の圃場のクワの葉からウイルスRNAの検出を試みた。しかし,RT-PCRではBmMLVのゲノムRNAは検出されなかった。3.コートタンパク質に対する抗体の作製と抗原タンパク質の存否解析本ウイルスは,ゲノムRNAに3つのORFを持つと予想される。コートタンパク質をコードすると推定されるORF2をバキュロウイルスで大量発現させ,タンパク質を合成した。それらをウサギに免疫してポリクローナル抗体を作製した。ウエスタンブロットの結果,抗体は得られていることが明らかになった。3.培養細胞株に潜在感染しているBmMLVの比較NIAS-Bm-aff3に感染しているウイルスの断片配列を,BmN細胞のBmMLVの配列と比較したところ,ほとんど差がなかった。NIAS-Bm-oyanagi1, SES-BoMo-J125K5, NIAS-BoMo-Cam1の3株の配列もほとんど同一であるので,BmMLVには明確な系統分化は起きていないと推定された。

1. The analysis of the replication mechanism of BmMLV in the past year has determined the structure of BmMLV RNA. The structure of BmMLV RNA in the past year has been determined. BmN cells contain a large amount of RNA in the 5'terminal alignment of BmMLV. This year, the replication mechanism of BmMLV has been identified and the structure of repeatedly aligned RNA has been analyzed. CAAAGTCAGC····CAAGCTCATG······The RNA is not clear when it comes to replication. 2. The origin of the virus is related to the origin and estimation of the virus. RT-PCR is the first step in detecting BmMLV RNA. 3. The production of antibodies and the existence or absence of antigens against the target RNA are expected. A large number of ORFs were found in the first place, and a large number of ORFs were found in the second place. It's not like we're going to be able to control it. The result of the test is that the body is resistant to light. 3. Comparison of BmMLV in cultured cell lines for potential infection NIAS-Bm-aff3 for infection and BmMLV in BmN cells for fragment alignment. NIAS-Bm-oyanagi1, SES-BoMo-J125K5, NIAS-BoMo-Cam1 and BmMLV were identified as the same species.