アポトーシスとアポトーシス細胞のファゴサイトーシス制御機構におけるASK1の役割

ASK1在凋亡中的作用及凋亡细胞吞噬控制机制

• 批准号: 16659019
• 负责人: 貞光 千春
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659019/
• 关键词: ASK1; アポトーシス; ファゴサイトーシス; MAPキナーゼ

本研究計画はストレス応答MAPキナーゼ経路など多岐にわたる分子で厳密に制御されるアポトーシス経路とそのアポトーシス細胞を除去するためのファゴサイトーシス経路が密接な制御機構と相互作用の上に成り立つことに注目し、とくに我々がアポトーシス経路ですでに重要な働きをすることを明らかにしてきたストレス応答MAP3キナーゼであるASK1についてファゴサイトーシスにおける役割を解明するものである。本年度はまずこれまでASK1結合分子を検索した結果、特異的に見出されたファゴサイトーシスや初期エンドソームの形成に関わる分子群(Vps28、Rufy2/Rabip4、VAMP-associated protein B/VAP-B、ALG-2など)についてクローニングを行い、発現を確認した。ASK1との結合や刺激依存性、また細胞内局在について現在検討を行っている。またマウスより調製したマクロファージを用いて、ファゴサイトーシスを再現性良く比較できる系の構築を行った。蛍光標識された大腸菌やビーズをマクロファージに加えファゴサイトーシスによって取り込まれる様子を観察できた。さらに貪食細胞においてファゴサイトーシスと活性酸素種の産生には深い関わりがあると考えられているが、我々は高感度活性酸素種検出蛍光プローブを用いてLPSなどの各種のマクロファージ活性化の刺激によって細胞内に活性酸素種が産生することを見出した。

This research project focuses on the closely regulated apoptotic pathways, such as the stress-responsive MAP kinase pathway, and the phagocytotic pathway for removing apoptotic cells, based on close regulatory mechanisms and interactions, and in particular, we will clarify the role of ASK1, a stress-responsive MAP3 kinase, which we have already revealed to have an important role in the apoptotic pathway.今年，我们首先搜索了ask1结合分子，并首先克隆了参与吞噬作用和早期内体形成的分子，这些分子被特异性发现（VPS28，rufy2/rabip4，vamp相关蛋白B/vap-b，alg-2等）。我们目前正在研究与Ask1的结合，其刺激依赖性和亚细胞定位。此外，使用小鼠制备的巨噬细胞用于构建一个可以重现吞噬作用的系统。可以观察到如何将荧光标记的大肠杆菌和珠子添加到巨噬细胞中，并被吞噬作用吸收。此外，尽管人们认为吞噬作用与吞噬作用中吞噬作用中的活性氧之间存在深厚的联系，但我们发现，可以通过使用高度敏感的反应型探险剂检测来刺激各种巨噬细胞活化来刺激各种巨噬细胞活化，从而在细胞内产生活性氧。

项目成果

Cardiac-specific Disruption of c-raf-1 Gene Induces Cardiac Dysfunction and Apoptosis.

c-raf-1 基因的心脏特异性破坏可诱导心脏功能障碍和细胞凋亡。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Clin.Invest. 114
• 作者: Ochiai R;Jyokura H;Suzuki A;Ohishi M;et al.;Osamu Yamaguchi
• 通讯作者: Osamu Yamaguchi