自然免疫系におけるアポトーシス細胞の貧食に伴う炎症調節機構の解明

阐明先天免疫系统中与凋亡细胞吞噬作用相关的炎症调节机制

• 批准号: 15019062
• 负责人: 田中 正人
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019062/
• 关键词: アポトーシス; マイクロファージ; ファゴサイトーシス; MFG-E8; SHPS-1; Del-1

食細胞によるアポトーシス細胞の貧食に関与するMFG-E8以外の分子を同定する目的で、マクロファージ細胞株BAM3細胞の表面抗原に対するモノクローナル抗体を作成し、この細胞の死細胞貧食に影響を与える抗体をスクリーニングしたところ、貧食を阻害する複数の抗体を得た。この抗体の認識する分子をアフィニティークロマトグラフィーにより精製し、質量分析により解析したところ、すべてSHPS-1と呼ばれる分子に対する抗体であった。種々の解析によりSHPS-1はターゲット細胞上のCD47分子と結合することにより、アポトーシス細胞をマクロファージにつなぎとめる(tethering)働きを持ち、死細胞の効率のよい貧食に寄与する分子であることが明らかとなった。また我々は、上述のMFG-E8分子と高い相同性を持つ、Del-1と呼ばれる分子の発現と機能解析を行った。Del-1はMFG-E8と同様にそのC末端のC1,C2damainでアポトーシス細胞上のフォスファチジルセリンに結合し、N末端のEGF-like domainでインテグリンに結合することにより、死細胞の貧食を促進する分子であることが分かった。またDel-1は種々のマクロファージに発現を認めたが、興味深いことに、各々のマクロファージはMFG-E8かDel-1のどちらか一つの分子のみを発現していることが分かった。現在、MFG-E8を含めたこれらの分子の生体内での機能について詳細に検討を行っている。アポトーシス細胞の貧食に伴う炎症調節の分子機構の解明については、現在までのところ、腹腔マクロファージにおいて貧食後にLPS刺激を行うと、抗炎症作用を有するサイトカインの産生量が5-10倍程度増加することを確認しており、アッセイ系の確立とそれによるマクロファージ表面抗原に対するモノクローナル抗体のスクリーニングにより、この現象に関与する分子群の同定を進めている。

To identify molecules other than MFG-E8 that are involved in cell poverty, a cell line BAM3 was developed to identify antibodies to the surface antigen of the cell, and to identify antibodies that are involved in cell poverty. The molecular structure of the antibody was analyzed by mass spectrometry. The analysis of SHPS-1 cells on CD47 molecules and binding, loss of cells on the cell line, the rate of death of cells in the poor and the molecular. The above MFG-E8 molecules have high identity, Del-1, and functional analysis. Del-1 binds to C1,C2damain at the C-terminal of MFG-E8 and EGF-like domain at the N-terminal of MFG-E8 and promotes apoptosis in dead cells. Delta-Del-1 is the first to be discovered in the world. Delta-Del-1 is the first to be discovered in the world. Now, MFG-E8 contains the function of the molecule in vivo. The molecular mechanism of apoptosis associated with inflammatory regulation was clarified by LPS stimulation and anti-inflammatory effect. The production of LPS increased by 5-10 fold. The identity of the molecular group associated with this phenomenon has been established.

项目成果

R.Hanayama et al.: "Expression of developmental endothelial locus-1 in a subset of macrophages for engulfment of apoptotic cells."J.Immunol.. in press. (2004)

R.Hanayama 等人：“巨噬细胞子集中发育内皮基因座 1 的表达，用于吞噬凋亡细胞。”J.Immunol.. 正在出版。

K.Tada et al.: "Tethering of apoptotoic cells to phagocytes through binding of CD47 to SHPS-1."J.Immunol.. 171. 5718-5726 (2003)

K.Tada 等人：“通过 CD47 与 SHPS-1 结合将凋亡细胞束缚于吞噬细胞。”J.Immunol.. 171. 5718-5726 (2003)

H.Nagase et al.: "Mutually regulated expression of caspase-activated, DNase and its inhibitor for apoptotic DNA fragmentation"Cell Death & Differ.. 10(1). 142-143 (2003)

H.Nagase 等人：“Caspase 激活的 DNase 及其抑制剂对凋亡 DNA 片段的相互调节表达”细胞死亡