Single Cell Oilの新展開「機能性脂肪酸から構造脂質・機能性脂質へ」

单细胞油新进展“从功能性脂肪酸到结构性脂质和功能性脂质”

• 批准号: 17658040
• 负责人: 清水 昌
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17658040/
• 关键词: Single Cell 0il; 構造脂質; トリアシルグリセロール; Mortierella alpina; ジアシルグリセロール; 高度不飽和脂肪酸; リパーゼ; triarachidonyl glycerol; Single cell oil; アラキドン酸

近年、ジアシルグリセロール(DG)は、その特異な栄養機能から新規機能性脂質として注目を集めている。そこで、高度不飽和脂肪酸含有トリアシルグリセロール(TG)を高生産する油糧微生物Mortierella alpina 1S-4株からジアシルグリセロールを特異的に蓄積する変異株の取得を試みた。野生株1S-4に変異処理を施した菌体からBligh-Dyer法により脂質を抽出した後、薄層クロマトグラフィー(TLC)と高速液体クロマトグラフィー(HPLC)で分析するという2段階のスクリーニングを行った。その結果、脂質中のTGの割合が少なく、DGの含有量が高い変異株(KY1株)を取得した。2%グルコース、1%酵母エキスの液体培地にて、28℃、8日間培養して得られた変異株と親株1S-4について、TLCにてTG、DG、遊離脂肪酸、極性脂質(PL)を分画し、経時的に定量分析したところ、培養6日目にKY1株ではDG量が乾燥菌体1gあたり8.8mgに達し、同じ培養日数における親株のDG量(1.1mg/g乾燥菌体)を大きく上回った。また、PLも親株より多くなっており、親株の総脂質中のPL含有率は10%以下であるのに対し、KY1株においては培養8日目にPLが総脂質の35%に達した。なお、各脂質成分中の脂肪酸組成を分析したところ、親株とKY1株の間に大きな違いは見られなかった。KY1株は高度不飽和脂肪酸含有率の高いDGの生産に適した変異株であると考えられた。TGのacidolysisならびにglyceride synthesisによるグリセロールへの特異的脂肪酸の導入に有用なリパーゼの探索を行った結果、Pseudomonas fluoresoens HU380株、ならびに、P.flucresoens AK102株にユニークな脂肪酸特異性を示すリパーゼを見いだした。

In recent years, ジアシルグリセロール(DG)は, そのspecific nutritional function からnew functional lipids and としてAttention をSETめている.そこで, highly unsaturated fatty acid containing トリアシルグリセロール(TG)をhigh-production する oil and grain microorganism Mortierella alpina 1S-4 strains of からジアシルグリセロールをspecific にaccumulation する変different strains のGet を trial みた. The wild strain 1S-4 has been treated with different strains and the bacterial cells have been treated with the Bligh-Dyer method. The lipids have been extracted and the thin layer has been applied. TLC (TLC) and high-speed liquid liquid analysis (HPLC) 2-stage analysis. As a result, a different strain (KY1 strain) with a high TG content in lipids and a low TG content were obtained. 2% グルコース, 1% yeast エキスのliquid cultivation ground にて, 28℃, 8 days cultured られた変different strains とParent strain 1S-4 について, TLC にてTG, DG, free fatty acid, polar lipid (PL) を分画し, 経Quantitative analysis of the time, KY1 strain cultured for 6 days, DG amount, dry bacterial cells 1g, 8.8m gに达し, the same number of culture days as the parent strain, the DG amount (1.1mg/g dry bacteria) is the same as the previous one. The content of PL in the lipids of また, PL parent strain より多くなっており, and parent strain の総 lipid is less than 10%であるのに対し, KY1 strain においては cultured for 8 days にPL が総 lipid の35% に达した.なお, analysis of the fatty acid composition in each lipid component, したところ, parent strain KY1 strain の间に大きなviolation いは见られなかった. The KY1 strain has a high content of highly unsaturated fatty acids, and the production of DG is suitable for the same strain. TGのacidolysisならびにglyceride synthesisによるグリセロールへのSpecific fatty acid introductionにUsefulなリパーゼのExplorationを行ったResults, Pseudomonas fluoresoens HU380 strain, P.flucresoens strain AK102 strain and fatty acid specificity test.

项目成果

Identification and production of n-8 odd-numbered polyunsaturated fatty acids by a 12 desaturation-defective mutant of Mortierella alpina 1S-4

高山被孢霉 1S-4 12 去饱和缺陷突变体的 n-8 奇数多不饱和脂肪酸的鉴定和生产

• 发表时间: 2006
• 期刊: Lipids 41(6)
• 作者: J.Liu;M.Yamagishi;C.Uhde-Stone;B.Bucciarelli;D.Samac;D.Allan;C.Vance;T.Abe et al.;S.Zhang et al.
• 通讯作者: S.Zhang et al.

油脂をつくる微生物の探索と育種-最近の進歩-

油脂生产微生物的探索与选育-最新进展-

• 发表时间: 2005
• 期刊: 学術月報 58(10)
• 作者: J.Liu;M.Yamagishi;C.Uhde-Stone;B.Bucciarelli;D.Samac;D.Allan;C.Vance;T.Abe et al.;S.Zhang et al.;J.Ogawa et al.;Y.Kojima et al.;Y.Kojima et al.;小川 順 ら;竹野 誠記 ら
• 通讯作者: 竹野 誠記 ら

A novel fungal ω3-desaturase with wide substrate specificity from arachidonic acid-producing Mortierella alpina 1S-4

• DOI: 10.1007/s00253-004-1760-x
• 发表时间: 2005-03-01
• 期刊: APPLIED MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY
• 影响因子: 5
• 作者: Sakuradani, E;Abe, T;Shimizu, S
• 通讯作者: Shimizu, S

Different specificity of two types of Pseudomonas lipases for C20 fatty acids with a Δ5 unsaturated double bond and their application for selective concentration of fatty acids

• DOI: 10.1263/jbb.101.496
• 发表时间: 2006-06-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOSCIENCE AND BIOENGINEERING
• 影响因子: 2.8
• 作者: Kojima, Yuzo;Sakuradani, Eiji;Shimizu, Sakayu
• 通讯作者: Shimizu, Sakayu

Functional characterization of Delta9 and omega9 desaturase genes in Mortierella alpina 1S-4 and its derivative mutants.

• 发表时间: 2006
• 期刊: Applied microbiology and biotechnology
• 影响因子: 5
• 作者: T. Abe;E. Sakuradani;T. Asano;H. Kanamaru;S. Shimizu