寄生虫のゲノムタイピングによる降海銀ウナギの生息地域の解明

通过寄生虫基因组分型阐明银鳗的栖息地

• 批准号: 17658091
• 负责人: 望岡 典隆
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17658091/
• 关键词: ウナギ; 寄生虫; ウキブクロセンチュウ; ミトコンドリアDNA

本研究はウナギ鰾内に寄生するウキブクロセンチュウ類(Auguillicola)のmtDNAの塩基配列情報に基づき、本種の東アジア各地域における遺伝的変異を明らかにする。そして得られたDNAマーカーに基づいて、東シナ海を産卵回遊中の銀ウナギ鰾内の同線虫がどの地域個体群であるかを特定し、ウナギの生息地域を明らかにすることを目的とした。平成18年度は、日本の太平洋側では栃木県、宮崎県において、日本海・東シナ海側では福井県、福岡県、鹿児島県において天然ウナギ計85個体を採集した。銀ウナギは長崎県から山口県沖合および紀伊水道で採集した。中国においては山東省青島と福建省廈門で採集を試みたが、天候不良や河川の汚染がひどく、汽水域や河川で天然ウナギを採集することはできず、魚市場で計10個体を入手した。得られたウナギは体各部の測定を行ったのちに、生殖線、耳石および鰾を摘出した。耳石は核を含む面が表出するまでダイアモンドペーストを用いて鏡面に研磨し、波長分散型マイクロアナライザーを用いて、SrとCaの含量を中心核から縁辺部に向かって測定し、塩分環境履歴を明らかにした。また、摘出した鰾から寄生虫を取り出し、形態の観察と計測を行った。耳石解析の結果、用いた天然ウナギは全て淡水生活型であった。銀ウナギを含む日本産では供試魚全体の約60%にAnguillicola crasiusの寄生がみられた。中国で得たウナギにはウキブクロセンチュウ類の寄生は見出されなかった。寄生虫から全DNAを抽出し、ミトコンドリアDNA遺伝子のうち、チトクロームb領域,12S/16SリボゾームRNA領域300-500bpをPCR法により増幅した。銀ウナギを含む日本産ウナギに寄生していたA.crasiusのいずれの遺伝子配列にも差異は認められず、これらは遺伝的に均質であることが明らかにされた。

In this study, we investigated the genetic diversity of mtDNA in Auguillicola and its genetic diversity in different regions. In addition, the number of individuals living in the same region in the sea has been increased. Heisei 18 years ago, Japan Pacific side Tochigi, Miyazaki, Japan Sea, East Sea side Fukui, Fukuoka Prefecture, Kagoshima Prefecture 85 individuals were collected Silver China, Qingdao, Shandong Province, Xiamen, Fujian Province, China, China All parts of the body were measured, and the reproductive line, otolith and other parts were extracted. When the otolith is exposed on the surface containing the core, it can be polished by a mirror, and the wavelength-dispersed mucronalinite can be used. The content of Sr and Ca can be measured from the central core to the outer parts, and the environmental performance can be clearly understood. Parasite extraction, morphology and measurement The result of otolith analysis, using natural About 60% of the total fish tested were Anguillicola crasius. China has obtained Parasite complete DNA extraction, amplification by PCR, amplification by PCR, 12S/16S RNA A.crasius and B. crasius are the most important elements in the family.