カロリー制限により誘導される遺伝子発現情報に基づく健康長寿の分子基盤の解明

基于热量限制诱导的基因表达信息阐明健康长寿的分子基础

• 批准号: 17659088
• 负责人: 伊藤 雅史
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Gifu International Institute of Biotechnology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659088/
• 关键词: カロリー制限; 健康長寿; トランスクリプトーム; プロテオーム; SIRT1

カロリー制限による酵母の寿命延長に、NAD依存症ヒストン脱アセチル化酵素Sir2が関与していることが明らかにされ、哺乳動物では、Sir2ホモログであるSIRT1が標的タンパク質の脱アセチル化を介してアポトーシスを抑制しストレス抵抗性を高めること等が示された。一方で、SIRT1の過剰発現がポリグルタミン凝集による神経細胞死を抑制すること、カロリー制限によりSIRT1の発現レベルが増加することが報告された。本研究では、細胞・組織レベルで、カロリー制限・SIRT1により誘導される遺伝子の発現変化を、Affymetrix社のGeneChipを用いた網羅的解析により検討した。(1)生後1ヶ月から3ヶ月間カロリー制限(EODF;every other day feeding)を行ったマウスの脳では、heat shock protein等の遺伝子発現が増加していたが、SIRT1遺伝子の発現量に変化は認められず、通常のカロリー制限と異なり、EODFではSIRT1の誘導発現は起こらないものと考えられた。(2)ヒト正常・変異(脱アセチル化能欠損)SIRT1を誘導的に発現するマウスNIH3T3繊維芽細胞を用いた解析では、正常SIRT1で誘導されるが変異SIRT1では誘導されない遺伝子として、シグナル伝達に関与する遺伝子が多く同定された。(3)SIRT1をsiRNAによりノックダウンしたPC12褐色細胞腫細胞を用いた解析においても、シグナル伝達に関与する遺伝子およびそれらの標的遺伝子の発現が主に変化していた。現在、それぞれの遺伝子の発現変化を定量的RT-PCR・ウェスタンブロット解析で確認するとともにプロテオーム解析を行っており、これらのプロファイリングデータからカロリー制限・SIRT1により誘導される遺伝子・タンパクさらには細胞応答を明らかにすることができる。

The life extension of yeast, NAD dependent enzyme Sir2, mammalian, SIRT1, target enzyme Sir2, target enzyme Sir2, target In one case, SIRT1 over-expression was reported as an inhibition of neuronal cell death due to aggregation, as well as an increase in SIRT1 over-expression due to regulatory limitations. In this study, we investigated the expression of genes in cells, tissues, and tissues, as well as the analysis of genes in Affytrix GeneChip. (1)From the first month to the third month after birth, EODF (every other day feeding) has been implemented, the detection of genes such as heat shock protein has increased, the detection of SIRT1 genes has changed, the usual EODF restrictions have changed, and the induced detection of EODF and SIRT1 has changed. (2)SIRT1 is induced in normal, abnormal (abnormal) and abnormal (abnormal) cells. NIH 3T3 cells are analyzed in vitro. SIRT1 is induced in normal, abnormal and abnormal cells. (3) SIRT1 siRNA is used to analyze PC12 brown cells, and the expression of target genes is mainly transformed. Now, all kinds of gene expression are quantified by RT-PCR, which is used to analyze the gene expression and confirm the gene expression.