遺伝子ノックダウン法による顆粒膜細胞機能・卵巣内分泌機能の新解析システム確立

基因敲除法建立颗粒细胞功能和卵巢内分泌功能新分析体系

• 批准号: 17659520
• 负责人: 湯川 和典
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659520/
• 关键词: 顆粒膜細胞; C; EBP; STAT3; estrogen; progesterone

平成19年度初頭に大学動物実験室のマウス肝炎ウイルス汚染が発見され、飼育マウスは全頭屠殺した。半年間の観察期間後の再飼育でもウイルス汚染が検出され、動物実験室閉鎖がまだ続いている。そこで、研究方向転換を余儀なくされ、今年度はin vitro解析を中心とした。本研究は、穎粒膜細胞機能や卵巣内分泌機能の網羅的解析を可能とする新実験系構築を目標とした。C/EBP-beta欠損マウスやSTAT3欠損マウスから穎粒膜細胞を分離培養解析してきたが、動物実験中断にて、凍結保存穎粒膜細胞を用いた解析に方向転換し、若干の成果を得た。最終的に追加マウス新鮮細胞を用いた確認実験と発展研究が不可欠のため、マウス飼育解禁後追加実験を予定している。遺伝子欠損細胞は細胞分化が中断されるため、同時にsiRNA遺伝子ノックダウン法で顆粒膜細胞に時限的遺伝子発現抑制を導入し、複雑な分化過程解析も試みた。マウス細胞供給が断たれ、顆粒膜細胞のsiRNA導入実験は中断している。全く新しいアプローチのため、現在も試行錯誤で研究を推進しており、まだごく一部のデータしか公開できない。追加実験結果を得てからの発表を予定している。(1)マウス顆粒膜細胞の培養増殖分化誘導システムの確立:顆粒膜細胞in vitro増殖実験系とin vitro黄体化実験の実験系確立を目指した。さらに細胞間相互作用、形態再構築機能、細胞の分化過程を解析するべく、green mice由来顆粒膜細胞とのキメラ細胞塊で細胞社会学的研究も行った。各マウス細胞至適培養条件は予想がついたが、マウス細胞補給が断たれ、研究は中断している。動物飼育解禁後の追加実験を予定している。(2)遺伝子破壊雌マウス由来の顆粒膜細胞を用いたシステムの樹立:(1)の培養実験系で、まず野生型および遺伝子欠損マウスの顆粒膜細胞in vitro黄体化実験を行い、排卵障害機序と回復法を検討してきた。これも、動物飼育解禁後の追加実験を予定している。

At the beginning of 2019, the university animal husbandry department discovered that hepatitis caused pollution, and the animal husbandry department killed all the animals. After half a year's observation period, re-breeding will be carried out, and the animal's laboratory will be closed. This year's study is in the center of vitro analysis. The purpose of this study is to analyze the network of mitochondrial function and endocrine function, and to construct a new system. C/EBP-beta is not damaged, it is not damaged, it is isolated, cultured and analyzed, animal culture is interrupted, frozen and preserved, and some results are obtained. Finally, the new cells were added to confirm the development of the study, and the new cells were added after the release of the breeding ban. Analysis of the process of cell differentiation and induction of gene expression inhibition in granular membrane cells by siRNA Cell supply is interrupted, and siRNA delivery into granular membrane cells is interrupted. All new and new research is now being done. The announcement will be determined after additional actual results are obtained. (1)Establishment of the culture and differentiation system of granular membrane cells: establishment of the culture and differentiation system of granular membrane cells in vitro In addition, the study of cell-cell interaction, morphological remodeling function, cell differentiation process analysis, green rice origin, granular membrane cells, cell mass and cell sociology has been carried out. Each cell is cultured under suitable conditions, and the supply of cells is interrupted. Additional requirements after animal breeding ban (2)The establishment of the system of granular membrane cells from which the female embryo is derived: (1) The culture system, wild type and female embryo are damaged. The granular membrane cells in vitro luteinization process, ovulation disorder mechanism recovery method are discussed. The additional requirements after the ban on animal breeding shall be determined.

项目成果

抗がん剤の卵巣毒性とその予防法

抗癌药物的卵巢毒性及其预防方法

• 发表时间: 2006
• 期刊: 日本臨床 64
• 作者: 田中哲二;宇都宮智子;梅咲直彦
• 通讯作者: 梅咲直彦

Topoisomerase I inhibitor誘発卵巣顆粒膜細胞アポトーシスにおけるBCL-2familyの意義

BCL-2家族在拓扑异构酶I抑制剂诱导卵巢颗粒细胞凋亡中的意义

• 发表时间: 2007
• 期刊: 日本受精着床学会雑誌 24(1)(印刷中)
• 作者: Yusuke Murakami;M.D.;et al.;宇都宮智子 ほか
• 通讯作者: 宇都宮智子 ほか

抗癌剤誘発卵巣障害を予防するためのGnRH agonist療法と GnRH agonist感受性の個人差

GnRH激动剂治疗预防抗癌药物引起的卵巢损伤及GnRH激动剂敏感性的个体差异

• 发表时间: 2006
• 期刊: 日本受精着床学会雑誌 24(1)(印刷中)
• 作者: 田中哲二;宇都宮智子;ほか
• 通讯作者: ほか

Deletion of the kinase domain from death-associated protein kinase enhances spatial memory in nice.

从死亡相关蛋白激酶中删除激酶结构域可以增强尼斯的空间记忆。

• 发表时间: 2006
• 期刊: International Journal of Molecular Medicine 17
• 作者: Yukawa K;et al.
• 通讯作者: et al.

Topoisomerase I inhibitorによる卵巣顆粒膜障害の発生機序

拓扑异构酶I抑制剂引起卵巢颗粒层损伤的机制

• 发表时间: 2005
• 期刊: 日本受精着床学会雑誌 22(印刷中)
• 作者: 宇都宮智子;田中哲二;ほか
• 通讯作者: ほか