微小気泡を用いた超音波遺伝子導入の発現効率向上法に関する検討

利用微泡提高超声基因转移表达效率的方法研究

• 批准号: 18650139
• 负责人: 工藤 信樹
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18650139/
• 关键词: 超音波; ソノポレーション; 遺伝子導入; 微小気泡; パルス超音波; タイムラプス観察; 遺伝子発現; 持続培養

○パルス超音波による遺伝子導入の実証従来,連続波もしくは波数の多いバースト波を用いて行われてきたソノポレーションが,波数3波程度の短い超音波パルスを1回照射するだけでも実現できることを,GFP遺伝子の導入と発現のタイムラプス観察を通じて実証した.しかしその導入効率は低く,パルス超音波が撹拌効果を持たないことが原因の一つと考えられた○遺伝子付着気泡の作成撹拌効果を持たないペルス超音波でも効率が高いソノポレーションを実現するための方法として,細胞に穿孔をもたらす微小気泡自体に遺伝子を付着させる方法について検討した.その結果,アルブミンとGFP遺伝子を混入した生理食塩水を撹拌することで,遺伝子が付着した直径数ミクロンの微小気泡を再現性良く作成できることを確認した.○導入効率の向上上記で作成した気泡を用いて,遺伝子導入効率の向上効果を調べた.GFT遺伝子を培養液中に懸濁させた条件と気泡に付着させた条件で発現効率を調べた結果,気泡に付着させることによって導入効率が,培養駅に懸濁させた場合の約4倍に向上することを確認した.○気泡の種類による膜損傷の違い種々の気泡を用いてパルス超音波を用いたソノポレーションを行い,細胞の損傷率と修復率が気泡の種類によってどのように変化をするかを調べた.その結果,気泡の種類に依存して修復率が60%から100%近くまで変化することが確認され,ソノポレーションに最適な気泡の開発の可能性が示された.

○绿色超声波探测器子系统进入负担负担来，绿色超声波探测器子系统数量多的超声波应用负担率低，波数3波度短的超声波探测器子系统1回发光二极管探测器子系统进入负担来，绿色超声波探测器子系统进入负担率低，由于一个人的考试成绩不理想，致使考生在考试中出现了一个人的成绩不理想的情况，考生就必须承担起考试成绩不理想的责任。考生必须承担起考试成绩不理想的责任，绿色荧光蛋白GFP微球掺加绿色生物饲料jv水溶性微球，微球负向于微球直径数为100 μ m的微球微小泡再感染性粒序序作为微球。螺杆菌泡沫支付着泡沫塑料泡沫塑料泡沫进入率，泡沫塑料泡沫塑料泡沫复合材料泡沫4倍以上的泡沫塑料泡沫塑料泡沫膜泡沫塑料泡沫墙板泡沫塑料泡沫进行，泡沫塑料幽门螺杆菌依赖性口腔修复率为60%至100%，接近幽门螺杆菌化消化不良，幽门螺杆菌感染率最高的幽门螺杆菌感染可能性表现为腹泻。

项目成果

Molecular therapy using ultrasound: Mechanisms involved in drug activation, apoptosis induction, gene transfer, and alterations of gene expression.

使用超声的分子治疗：涉及药物激活、细胞凋亡诱导、基因转移和基因表达改变的机制。

• 发表时间: 2007
• 作者: T. Kondo;ら
• 通讯作者: ら

医用超音波の最新技術:超音波造影法と超音波治療

医学超声最新技术：超声造影和超声治疗

• 发表时间: 2008
• 作者: Kudo;N.;藤原勝夫 (編著);宮下英樹;藤原 勝夫(編著);工藤信樹
• 通讯作者: 工藤信樹

Sonoporationによる細胞膜変化のタイムラプス観察

声孔延时观察细胞膜变化

• 发表时间: 2007
• 期刊: 日本超音波医学会基礎技術研究会資料 2007(2)
• 作者: Katsuo Fujiwara;Kenji Kunita;Hitoshi Watanabe;渡辺大士
• 通讯作者: 渡辺大士

No contribution of sonochemical effects in cell membrane damage induced by single-shot pulsed ultrasound with an adjacent microbubble

声化学效应对邻近微泡的单次脉冲超声诱导的细胞膜损伤没有贡献

• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Medical Ultrasonics (投稿中)
• 作者: Okada;K.
• 通讯作者: K.

Biomolecular effects of low-intensity ultrasound: Apoptosis, sonotransfection, and gene expression

• DOI: 10.1143/jjap.46.4435
• 发表时间: 2007-07-01
• 期刊: JAPANESE JOURNAL OF APPLIED PHYSICS PART 1-REGULAR PAPERS BRIEF COMMUNICATIONS & REVIEW PAPERS
• 作者: Feril, Loreto B., Jr.;Kondo, Takashi;Tachibana, Katsuro
• 通讯作者: Tachibana, Katsuro