ナノ構造支援表面レーザーイオン化によるグリコプロテオームのブレークスルー

纳米结构辅助表面激光电离在糖蛋白质组方面取得突破

• 批准号: 18657037
• 负责人: 和田 芳直
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18657037/
• 关键词: 質量分析; レーザー脱離イオン化; 糖タンパク質; ナノ構造; 表面イオン化

マトリックス補助剤を必要としないレーザー脱離イオン化のために開発したサブミクロンレベルの凹凸を形成した多孔アルミナの表面を金属で被覆した構造をもつ試料板について、その表面金属の役割を初年度に明らかにした。その成果を論文として発表するために、低分子を中心に糖、アミノ酸、脂質のデータを積み上げる一方で、この試料板が他の類似ナノ構造試料板と対比して優れた点であるクンパク質のイオン化についても、質量2万を超えるトリプシノーゲンの他、糖タンパク質であるリボヌクレアーゼBのデータを取得した。リボヌクレアーゼBについては、その高マンノース型糖鎖のプロファイルを忠実に再現する相対イオン強度で検出できることがわかった。以上の成果をもって、Analytical Chemistry誌に論文を掲載した。続いて、多孔アルミナ層の役割について研究を行った。試料板を60℃、120℃、280℃で加熱すると温度依存性にイオン化性能を失うことを見出した。このことから、アルミナ表面に吸着している水分子がイオン化(=プロトン付加)に関与することがわかった。さらに、試料の溶媒に酸を加えることがイオン化を改善しないという、MALDIやDIOSなどと異なる点を明らかにした。後者の所見もアルミナ表面の水がプロトン源となっていて、従来から考えられていた試料添加前の溶液においてすでに存在しているイオンpreformed ionsが脱離するのではないことを明らかにした。すなわち、多孔アルミナ層において、露出するアルミナ面が広いほどイオン化性能が高いと推測されたので、細孔形態を工夫して露出面積を大きくしたところ、予想通りに性能を向上することができた。今後、薬物血中濃度の迅速定量や糖鎖解析など応用面での展開を計画しているが、この特異な試料板の基本情報を2年間の研究において得ることができた。(研究協力者:首都大学東京 益田秀樹教授;神奈川科学技術アカデミー 柳下崇研究員)

The surface of the sample plate is covered with a metal coating structure, and the surface of the sample plate is covered with a metal coating structure. The results of this paper are as follows: 1. low molecular weight, central sugar, acid, lipid and other similar structure sample plate, 2. high molecular weight, 20,000 mass, 3. high molecular weight, lipid and other components. The color of the color. The above results were published in Analytical Chemistry Journal. The research on porous and porous layers is carried out. Sample plates are heated at 60℃, 120℃ and 280℃. Temperature dependence is observed. The water molecules adsorbed on the surface of the water column were converted into water molecules. For example, if the solvent is added to the sample, the MALDI will change the solvent. The latter is observed in the presence of water on the surface of the sample before it is added. The surface of the porous layer is exposed to high temperature and the pore morphology is exposed to high temperature and high temperature. In the future, rapid quantitative analysis of blood concentrations of chemicals and carbohydrate chains will be carried out in two years. (Research collaborators: Professor Hideki Mashida, Tokyo Metropolitan University; Takashi Yanagawa, Research Fellow, Kanagawa Science and Technology)

项目成果

Mass spectrometry for congenital disorders of glycosylation, CDG

• DOI: 10.1016/j.jchromb.2006.02.028
• 发表时间: 2006-06-21
• 期刊: JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B-ANALYTICAL TECHNOLOGIES IN THE BIOMEDICAL AND LIFE SCIENCES
• 影响因子: 3
• 作者: Wada, Yoshinao

Determination of unique amino acid substitutions in protein variants by peptide mass mapping with FT-ICR MS

通过 FT-ICR MS 肽质量图谱确定蛋白质变体中的独特氨基酸取代

• 发表时间: 2006
• 期刊: J Am Soc Mass Spectrom 17・4
• 作者: Tanaka K;Takenaka S;Tsuyama S;Wada Y
• 通讯作者: Wada Y

表面支援レーザー脱離イオン化のための多孔アルミナ試料板における規則性細孔構造と表面金属

用于表面辅助激光解吸电离的多孔氧化铝样品板中的规则孔结构和表面金属

• 发表时间: 2007
• 作者: 和田芳直;柳下崇;益田秀樹
• 通讯作者: 益田秀樹

実験化学講座

实验化学课程

• 发表时间: 2006
• 作者: 大野春香;他;安永卓生
• 通讯作者: 安永卓生

A systematic study on the geometric factors of alumina nanohole arrays and coating metals for surface-assisted laser desorption/ionization of biomolecules.

对用于表面辅助激光解吸/电离生物分子的氧化铝纳米孔阵列和涂层金属的几何因素进行系统研究。

• 发表时间: 2007
• 作者: Wada Y;Yanagishita T;Masuda H.
• 通讯作者: Masuda H.