糖鎖欠損糖蛋白症候群の病因解析とオリゴ糖転移酵素のクローニング

碳水化合物缺乏糖蛋白综合征的病因分析及寡糖转移酶的克隆

• 批准号: 05274231
• 负责人: 和田 芳直
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05274231/
• 关键词: CDG症候群; トランスフェリン; ドリコール; 質量分析

これまでの研究からCDG症候群では糖蛋白質への糖鎖付加初期反応に異常があると考えた。また近親婚の兄弟例があることから常染色体劣性遺伝病であると推定され、酵素異常の仮定のもとに特にドリコール合成からオリゴ糖転移までの酵素群のうちドリコールキナーゼ・GlcNAc-1-P転移酵素・オリゴ糖転移酵素の3つに的を絞って研究を進めた。しかし、現在までのところ、我々の兄妹例から採取した線維芽細胞マイクロゾーム分画の酵素活性では有意の結果を得られていない。一方、尿中ドリコールの測定では患者では正常の3倍を越えるフリードリコールが排泄されており、ドリコール利用の障害という上記の仮定を支持する結果であったが、これについては対照検体数を増やしてここに得られた結果が有意かどうかを検証する必要があると考えている。CDG症候群の症例はすべて言わば不完全型であることがその病因解析に困難をもたらしている。本症の生化学的診断は血中トランスフェリンの等電点電気泳動によっていたが、病因推定の根拠となった質量分析による分子量測定を発展させて診断法として確立するために、従来の方法より温和なレーザーイオン化法を応用し、トランスフェリン分子種の糖鎖付加状態の構成パターンを抽出することができた。数ピコモルで分析できるその感度とともにCDG症候群の多様な電気泳動パターンあるいは臨床像からの亜型を整理するのに役立つものと考えている。

CDG syndrome is characterized by the presence of glycoproteins and glycoproteins in the early stages of the disease. The study of the enzyme group of GlcNAc-1-P shift enzyme and glucose shift enzyme was carried out. The enzyme activity of cell culture and cell culture was found to be the result of this study. In one case, the determination of urine concentration in patients was more than 3 times normal, and the results supported the determination of excretion, utilization, impairment, and middle score. The symptoms of CDG syndrome are not complete, but the etiology is difficult to analyze. The biochemical diagnosis of this disease involves the development of molecular weight determination in the determination of isoelectric point electrokinetic activity in the blood, the root mass analysis of etiological presumptions, and the establishment of diagnostic methods. The sensitivity of CDG syndrome is analyzed by several methods.

项目成果

岡本伸彦,和田芳直ら: "Carbohydrate-Deficient Glycoprotein症候群の兄妹例" 日本小児科学会雑誌. 97. 779-786 (1993)

Nobuhiko Okamoto、Yoshinao Wada 等人：“碳水化合物缺乏糖蛋白综合征的兄弟姐妹病例”，日本儿科学会杂志 97. 779-786 (1993)。

Wada,Y.,Gu,J.,et al.: "“Diagnosis of carbohydrate‐deficient glycoprotein syndrome by matrix‐assisted laser desorption time‐of‐flight mass spectrometry"" Biol.Mass Spectrom. 23. 108-109 (1994)

Wada, Y., Gu, J., 等人：“通过基质辅助激光解吸飞行时间质谱诊断碳水化合物缺乏糖蛋白综合征””Biol.Mass Spectrom. 23. 108-109 (1994) ）

Hayashi,A.,Wada,Y.,et al.: "Studies on familial hypotransferrinemia:Unique clinical course and molecular pathology" Am.J.Hum.Genet.53. 201-213 (1993)

Hayashi, A.、Wada, Y. 等人：“家族性低转铁蛋白血症的研究：独特的临床过程和分子病理学”Am.J.Hum.Genet.53。

Saito,H.,Nishikawa,A.,Cu,J.,et al.: "cDNA cloning and chromosomal mapping of human N-acetylglucosaminyltransferase" Biochem.Biophys.Res.Commun.198. 318-327 (1994)

Saito,H.,Nishikawa,A.,Cu,J.,et al.：“人 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶的 cDNA 克隆和染色体作图”Biochem.Biophys.Res.Commun.198。

和田芳直(共著): "糖鎖 II.糖鎖と病態" 東京化学同人, 198 (1994)

和田义直（合著者）：《Glycans II. Glycans and Pathology》Tokyo Kagaku Doujin，198（1994）