昆虫ウイルス粒子に含まれるゲノム以外の核酸とその運び屋の探索

寻找昆虫病毒颗粒及其载体中所含的非基因组核酸

• 批准号: 18658022
• 负责人: 姜 媛瓊
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18658022/
• 关键词: バキュロウイルス; BmNPV; ウイルス粒子; 核内特定領域; 相互作用

主にチョウ目の昆虫を宿主とするバキュロウイルスは、環状の二本鎖DNAをゲノムとしてもち、宿主細胞自身のゲノム複製や遺伝子発現が厳しく制御されている核内で増殖を行うウイルスである。細胞に侵入したバキュロウイルスは、増殖に適した環境を整えるため宿主の様々なシステムを巧みに乗っ取ると考えられるが、その詳細は未解明なままである。本研究では、バキュロウイルスが行う宿主制御機構の一端を調べるため、ウイルス粒子に注目し、バキュロウイルス粒子にゲノムDNA以外の核酸であるRNAが含まれるか否かを検討することを目標としている。そのため、カイコを宿主とするバキュロウイルス(BmNPV)の粒子よりRNAの抽出を試みたが、RNAの存在を確認することができなかった。ウイルス粒子にはRNAが含まれていない、または含まれるものの超微量である、という両方の可能性が考えられるので、用いるウイルス量を増やし、RNA抽出を行う予定である。そこで、他の側面よりも宿主制御機構の解析を試みることにした。バキュロウイルスは核内の特定領域で複製を行うと考えられているが、この場所についてはあまり解析されておらず、特に関わっている宿主側の因子などについては全くわかっていない。そこで、BmNPVの増殖場所に局在するORF8と相互作用する宿主側のパートナーの探索を行った結果、総7つのクローンが得られた。酵母2-ハイブリッド法を用いて、相互作用の再現性の確認を行った結果、ORF8のN末端側半分がこれらの相互作用に大事であることがわかった。また、得られた宿主クローンの塩基配列においての特徴やウエスタン解析より、多くが細胞間のシグナルに関わるタンパク質である可能性が示唆された。そこで、阻害剤処理やRNAiによりそれぞれの宿主因子の発現抑制を施すと、ウイルスの侵入が影響を受けることが示唆された。

The host cell and its insect host cells are capable of replicating and reproducing DNA in the nucleus, and the host cells themselves are capable of replicating DNA in the nucleus. Cell invasion, growth, environment, host selection, and details remain unclear. In this study, we investigated the role of RNA in the regulation of host control mechanisms at one end of the spectrum, including the presence of nucleic acids other than DNA. The RNA is extracted and the presence of RNA is confirmed. The possibility of RNA extraction from particles is determined by the amount of RNA extracted from particles. The analysis of host control mechanism is carried out on the basis of the analysis of host control mechanism. In the core, the specific domain is copied and analyzed. In the host side, the specific domain is analyzed and analyzed. BmNPV's growth site is located in ORF8. The host side of the interaction is explored and the results are obtained. Yeast 2-D method was used to confirm the reproducibility of the interaction. The N-terminal half of ORF8 was used to confirm the interaction. The characteristics of the host cells and the characteristics of the host cells and the host cells are analyzed. The possibility of the host cells and the host cells are discussed. The expression of the host factor is inhibited by the treatment of RNAi, and the invasion of the host factor is inhibited by RNAi.

项目成果

The BRO proteins of Bombyx mori nucleopolyhedrovirus are nucleocytoplasmic shuttling proteins that utilize the CRM1-mediated nuclear export pathway

• DOI: 10.1016/j.virol.2006.01.008
• 发表时间: 2006-06-20
• 期刊: VIROLOGY
• 影响因子: 3.7
• 作者: Kang, WonKyung;Kurihara, Masaaki;Matsumoto, Shogo
• 通讯作者: Matsumoto, Shogo

Functional analysis of the interaction between BmNPV ORF8 and its host factors

BmNPV ORF8与其宿主因子相互作用的功能分析

• 发表时间: 2007
• 作者: T.Daimon;et al.;WonKyung Kang
• 通讯作者: WonKyung Kang

Comparative studies of Bombyx mori nucleopolyhedrovirus chitinase and its host ortholog, BmChi-h

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2006.04.112
• 发表时间: 2006-06-30
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Daimon, Takaaki;Katsuma, Susumu;Shimada, Toru
• 通讯作者: Shimada, Toru

カイコ核多角体病ウイルスのORF8と相互作用する宿主因子の解析

家蚕核型多角体病毒ORF8互作宿主因素分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 小林徹也;森下喜弘;冨岡亮太;合原一幸;Trey K Sato et al.;小林徹也;小林徹也;Tetsuya J. Kobayashi;Tetsuya J. Kobayashi;小林徹也;Tetsuya J. Kobayashi;姜 媛瓊
• 通讯作者: 姜 媛瓊

Functional characterization of chitinase from Cydia pomonella granulovirus

• DOI: 10.1007/s00705-007-1000-7
• 发表时间: 2007-09-01
• 期刊: ARCHIVES OF VIROLOGY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Daimon, T.;Katsuma, S.;Shimada, T.
• 通讯作者: Shimada, T.