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リパーゼ・スーパーインデューサー作用機構の解明と有用蛋白質大量生産システムの構築

阐明脂肪酶超级诱导剂的作用机制并构建有用蛋白质的大规模生产系统

基本信息

批准号：
18658037
负责人：
石塚盛雄
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Chuo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18658037/
关键词：
リパーゼ超誘導機構リパーゼ高級アルコール二成分制御システム脂質の資化発現制御界面活タンパク質超誘導長鎖炭化水素の資化スーパーインデューサー高級アルコールの資化界面活タンパク質タンパク質分泌制御ステアリルアルコールパルミチルアルコール蛋白質分泌制御

项目摘要

1.一連のリパーゼ・スーパー・インデューサー群のうち、高級アルコールの作用機構に関しては、翻訳後の活性レベルと膜の透過性への寄与は少ないため、リパーゼ遺伝子発現レベルでのシグナル伝達機構が示唆された。センサーキナーゼとレスポンスレギュレーターからなる二成分制御システム(BT. Nixon, et al. PNAS, 83,7850-7854,1986)は、べん毛回転方向の制御や転写調節等に重要な役割を演じているが、最近、リパーゼ発現レベルでも二成分制御システムが働くとの報告が出された(J. Krzeslak, et al. Appl. Environ. Microbiol.74,1402-1411,2008)。Nixonらの系では約3倍程度で、我々のスーパーインデューサーシステムの数十倍よりも劣っていたため、更に詳細な検討を加える為、このシステムの大腸菌等への移築を試みている。2.リパーゼ・スーパーインデューサーの添加よって菌体外に大量分泌される15kDa蛋白質(昨年度、長鎖炭化水素や脂質を乳化する界面活性タンパク質であることが判明)は、更なる機能解析とアミノ酸配列データの相同性解析から、久塚らが発見したプロテインアクティベーター(K. Hisatsuka, et al. Agr ic. Biol. Chem. 41,445-450,1977)と示唆された。最近,細菌のトリグリセリド、脂肪酸、n-アルカン等の細胞外脂質の資化システムにおいても、二成分制御システムが機能して環境変化に適応していることが判明しつつある。3.高級アルコールの添加よって、トリグリセリド資化システムと長鎖炭化水素資化システムの双方が極端に活性化される(共通の代謝産物である脂肪酸は活性化にほとんど寄与しない)ことは、バクテリアの環境適応システム解明の格好の材料を得たと思われる。リパーゼと界面活性タンパク質の共分泌および誘導機構のさらに詳細な解明により、有用蛋白質の大量分泌システム確立等への応用が期待できる。

1. A series of high-level and high-level communication mechanisms are involved in the process of communication between active and permeable membranes, and in the process of communication between active and permeable membranes. The two-component system is called BT. Nixon, et al. PNAS, 83, 7850 - 7854, 1986). The most important aspect of the two-component control system is that it has been reported that it has been developed recently (J. Krzeslak, et al. Appl. Environ. Microbiol.74,1402-1411,2008)。Nixon's system is about three times more complex, and the system is tens of times more complex, and more detailed. 2. 15kDa protein secreted in large quantities in vitro by the bacteria (identified as the interfacial activity of long-chain carbohydrates and lipids in the emulsion), functional analysis and identity analysis of acid alignment (K. Hisatsuka, et al. Agr ic. Biol. Chem. 41, 445 - 450, 1977). Recently, it has been found that the function of two-component control system of extracellular lipids such as bacteria, fatty acids, and n-acyl has changed due to environmental changes. 3. The addition of high-grade fatty acids and long-chain carbon-based fatty acids is extremely active on both sides of the system (common metabolites). Detailed understanding of the co-secretion and induction mechanism of the active interface, establishment of a large number of secretion mechanisms of useful proteins, etc. are expected.