RNAiレトロウィルスを用いた遺伝子ノックダウンマウス作製法の開発
利用RNAi逆转录病毒开发基因敲除小鼠生产方法
基本信息
- 批准号:18659074
- 负责人:
- 金额:$ 1.92万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:2006
- 资助国家:日本
- 起止时间:2006 至 2007
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
(1)受精卵に対するウイルスベクター導入方法の検定これまでの数少ない報告では、透明帯をタイロード液で除去した後にウイルス液に浸潤させ感染させる方法と、透明帯と受精卵の間の卵黄周囲腔にパッケージングしたウイルスを注入する方法が報告されているが、卵黄周囲腔にパッケージングしたウイルスを注入した方が効率が高いとの報告がある。そこで今年度は導入方法について検討した。サイレンシングを受けにくいモロニーウイルスベクターベースのレトロウイルスベクターでは遺伝子は、透明帯をタイロード液で除去した後にウイルス液に浸潤させ感染させる方法と、透明帯と受精卵の間の卵黄周囲腔にパッケージングしたウイルスを注入する方法の両方で、遺伝子がほとんど導入されないことが明らかとなった。GCDsapの遺伝子導入能力を確認するために、内部細胞塊と同様の性状を有するES細胞(129/Sv由来およびC57BL/6J由来)に蛍光タンパク質遺伝子を有するGCDsapを培養液中で感染させたところ、非常に効率良く遺伝子を導入すうことが出来た。従って現在のところ、1細胞期の受精卵でなぜ感染が起こらないかは不明であるが、胚盤胞期の受精卵にGCDsapをインジェクションする方法が有効である可能性がある。また、標準マウス系統であるC57BL/6JおよびNでレトロウイルスを用いた遺伝子導入を可能にするために、生殖細胞系列に伝達するES細胞を樹立するとともに、RNAiの検定が可能な蛍光物質恒常的に発現するC57BL/6J由来のES細胞を樹立した。研究計画(2)RNAiレトロウイルスを用いた遺伝子発現抑制の解析については遺伝子導入系が確立できなかったため、実施できなかった。
(1) the fertilized egg に す seaborne る ウ イ ル ス ベ ク タ ー import method の 検 set こ れ ま で の number less な い report で は, transparent 帯 を タ イ ロ ー で ド fluid to remove し た after に ウ イ ル に ス fluid infiltration さ せ infection さ せ と る method, transparent 帯 と fertilized egg の between の yolk weeks 囲 cavity に パ ッ ケ ー ジ ン グ し た ウ イ ル ス を injection す る methods が report さ れ て い る が , yolk weeks 囲 cavity に パ ッ ケ ー ジ ン グ し た ウ イ ル ス を injection し た party が sharper rate high が い と の report が あ る. Youdaoplaceholder0 で で the method for this year 's <s:1> introduction: に て検 て検 て検 discuss た. サ イ レ ン シ ン グ を by け に く い モ ロ ニ ー ウ イ ル ス ベ ク タ ー ベ ー ス の レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー で は heritage 伝 は, transparent 帯 を タ イ ロ ー で ド fluid to remove し た after に ウ イ ル に ス fluid infiltration さ せ infection さ せ と る method, transparent 帯 と fertilized egg の between の yolk weeks 囲 cavity に パ ッ ケ ー ジ ン グ し た ウ イ ル ス を injection す の る method The two sides で and the 伝 sub-son がほとん <s:1> import されな となった となった とが Ming ら となった となった. を GCDsap の posthumous son 伝 import ability affirms す る た め に, internal cell block と with others の traits are す を る ES cells (129 / Sv origin お よ び C57BL / 6 j origin) に 蛍 light タ ン パ ク qualitative heritage 伝 son を す る GCDsap を medium, で infection さ せ た と こ ろ, very に sharper rate good く heritage 伝 son を import す う こ と が out Come to た. 従 っ て now の と こ ろ, 1 cell の fertilized egg で な ぜ infection since が こ ら な い か は unknown で あ る が and stage blastoderm cell の fertilized egg に GCDsap を イ ン ジ ェ ク シ ョ ン す る が have sharper で あ る possibility が あ る. ま た, standard マ ウ ス system で あ る C57BL / 6 j お よ び N で レ ト ロ ウ イ ル ス を with い た posthumous son 伝 import を may に す る た め に, germ cell series に 伝 da す る を ES cells establish す る と と も に, RNAi の 検 may decide が な 蛍 light material constant に 発 now す る C57BL / 6 j origin の を ES cells establish し た . Research projects (2) the RNAi レ ト ロ ウ イ ル ス を with い た heritage 伝 son 発 is の に analytical つ い て は heritage 伝 son が import department to establish で き な か っ た た め, be で き な か っ た.
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Novel embryonic stem cells expressing tdKaede protein photoconvertible from green to red fluorescence.
表达 tdKaede 蛋白的新型胚胎干细胞可从绿色荧光转换为红色荧光。
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shigematsu Y.;et. al.
- 通讯作者:et. al.
Emblyonic stem cells derived from C57BL/6J and C57BL/6N.
胚胎干细胞源自 C57BL/6J 和 C57BL/6N。
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Tanimoto Y;et. al.
- 通讯作者:et. al.
Stable transgene expression in mice generated from retrovirally transduced embryonic stem cell.
由逆转录病毒转导的胚胎干细胞产生的小鼠中转基因的稳定表达。
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Hamanaka S;et al.
- 通讯作者:et al.
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高橋 智其他文献
18F-AV45 (Florbetapir)を用いた脳アミロイドイメージング.
使用 18F-AV45 (Flobetapir) 进行脑淀粉样蛋白成像。
- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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高校等に在籍する軽度発達障害児の教育実態-神奈川県の高校等への質問紙調査から-
高中等就读的轻度发育障碍儿童的实际教育状况 - 基于神奈川县内高中等的问卷调查 -
- DOI:
- 发表时间:
2006 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
内野智之;高橋 智 - 通讯作者:
高橋 智
卒業生からみた中学校「通級指導学級(相談学級)」と不登校生徒支援のあり方〜卒業生とその保護者への質問紙調査から〜
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- DOI:
- 发表时间:
2006 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
菊地雅彦;高橋 智 - 通讯作者:
高橋 智
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建立利用胎盘细胞移植产生人-小鼠嵌合体的方法。
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$ 1.92万 - 项目类别:
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