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ヒト末梢血幹細胞による血管再生に及ぼす酸化ストレスの影響と麻酔薬作用に関する研究

氧化应激和麻醉作用对人外周血干细胞血管再生影响的研究

基本信息

批准号：
18659462
负责人：
木下浩之
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Wakayama Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659462/
关键词：
末梢血幹細胞 CD34 スーパーオキシド

项目摘要

健常ボランティアの末梢静脈血より末梢血幹細胞を分離した。分離に際しては、問診及び血液検査でボランティアが健常であることを確認してから行った。細胞分離には、当該施設に現有のガンブロ社製血液成分分離装置(COBE Spectra WBC採取システム)を用いた。採取した血管内皮前駆細胞を採取可能なように、CD34陽性細胞である細胞のみを得られるように本装置でのアフェレーシスを設定した。まず、末梢血中単球全体の0.01%を占める血管内皮前駆細胞(EPCs)を採取した。その後、ヒトフィブロネクチン、5%ウシ血清と成長因子を加えた血管内皮細胞用の培養液(EBM-2)を用いて採取した細胞を現有の炭酸ガスインキュベータで培養した。これらにより、継代を8回行った培養EPCsの細胞浮遊液を作製し実験に使用した。培養EPCsの細胞浮遊液に対し、細胞内スーパーオキシド発生薬LY83583(5×10^-7 mol/L)を作用させ72時間培養した。昨年度のLY83583(10^-6 mol/L)検討結果と同様に、大多数が死滅するか、または大多数が生存するという非常に効果が不安定な結果がえられた。そこで、現在、LY83583に代わるスーパーオキシド発生系およびちょうど50%の細胞が死滅する程度のスーパーオキシド自体の投与を考案中である。次いで、対照、LY83583を加えた培養液に、静脈麻酔薬としてプロポフォール(10^-6 mo1/L)、吸入麻酔薬としてセボフルラン(1.0MAC)を加えその酸化ストレスに対する保護作用を検証する予定である。

Jian chang ボラをティアティア peripheral venous blood よ peripheral blood stem cells を isolation た. Separation に interstate しては, interrogation and び blood 検でボランティアが health often であることを confirm してから line った. Cell separation にに, when the facility に has a <s:1> ガ <e:1> ブロブロ social blood component separation device (COBE Spectra WBC adopts システム)を uses にた. Take したを駆 before vascular endothelial cells may take なように, CD34 positive cells である cells のみを have られるように this device でのアフェレーシスを set した. Youdaoplaceholder0, 単 globules in peripheral blood, <s:1> 0.01%を occupying める vascular endothelial preendothelial 駆 cells (EPCs), を taking た. , after そのヒトフィブロネクチン, 5% ウシと serum growth factor を plus えた endothelial cells with (EBM - 2) をの broth with いて take した cells をの existing carbon acid ガスインキュベータで cultivate した. <s:1> れらによれらによ and 継 are used in 8 consecutive った culture of EPCs with を. <s:1> cell plankton を is used in the experiment of に using た. Cultivate EPCs の cells floating liquid にし seaborne, intracellular スーパーオキシド発 raw 薬 LY83583 (5 x 10 ^ 7 mol/L) を role させ 72 time cultivating した. Yesterday's annual の LY83583 (10 ^ 6 mol/L) 検と for results with others in most がに, die out するか, または most が survival するという very に unseen fruit が unrest な results がえられた. そこで, now, LY83583 に generation わるスーパーオキシド発 born department およびちょうど 50% がの cells die out する degree のスーパーオキシド cast with autologous のを test case である. Time いで, as seaborne, LY83583 を plus えにた broth, vein hemp 酔薬としてプロポフォール (10 ^ 6 mo1 / L), suction hemp 酔薬としてセボフルラン (MAC) 1.0 を plus えその acidification ストレスにす seaborne る protection を検 card する designated である.