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常染色体優性網膜色素変性原因遺伝子の発現調節を用いた視細胞変性機序の解析

利用常染色体显性遗传色素性视网膜炎致病基因的表达调控分析感光细胞变性的机制

基本信息

批准号：
18659507
负责人：
中澤満
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Hirosaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659507/
关键词：
網膜色素変性ニルバジピン rdsマウスペリフェリン・RDS遺伝子

项目摘要

対象と方法ヒト常染色体優性網膜色素変性の動物モデルとしてへテロ接合体のretinal degeneration slow(ヘテロrds)マウスを作成し、その病態について詳しく検討した。ヘテロrdsマウスにカルシウム拮抗薬であるニルバジピンを200日腹腔内に連日投与した。投与終子後、網膜内での遺伝子発現の変化を調べるため、マイクロアレイ法を用いて対照群との各種遺伝子の発現比を検索した。発現が増大ないし減少した主な神経栄養因子や増殖因子について定量的RT=PCR法とウエスタンブロット法により発現を確認した。また200日間のうち20日ごとに網膜電図(ERG)を測定し、薬物の網膜機能に及ぼす影響を検索した。さらに形態的な特徴を探るため、200日間投与した後の組織所見をヘマトキシリン・エオジン染色にて光学顕微鏡的に観察するとともに、細胞内の所見を電子顕微鏡にて観察した。結果ヘテロrdsマウスに200日間ニルバジピンを腹腔内に投与したところ、ERGのa波およびb波ともに非投与群に比べて有意に振幅が大きく、薬物による視細胞変性阻止効果が確認された。形態的観察では、光学顕微鏡的には両者の間には差がなかったが、電子顕微鏡による形態計測では視細胞外節の円板構造が投与群では非投与群に比べその数において有意に形態が保たれていた。マイクロアレイによる遺伝子発現解析では、CNTF(ciliaryneurotrophic factor)の発現がニルバジピン投与により4倍に発現が亢進し、こればRT-PCRやウエスタンブロット法により確認された。ロドプシンタンパク質の発現量も投与群において上昇していた。考察ニルバジピン投与によりヘテロrdsマウスの網膜変性の進行は遅延する。その分子機構としてはニルバジピン投与による内因性のCNTFの発現が亢進するためであることが考えられた。本薬剤のヒトヘの治療効果が示唆される結果となった。

The method of analysis is to investigate the molecular mechanism of retinal degeneration in autosomal dominant retinal pigment. For example, if you want to buy a car, you can buy a car. After the injection, the change of gene expression in the retina is adjusted. The method of gene expression in the middle group is used to detect the ratio of gene expression in the retina. Detection of increased growth factors and growth factors in quantitative RT=PCR and detection of increased growth factors 200 days later, the retinal electroencephalogram (ERG) was measured, and the effects of retinal function were investigated. The morphological features of the cells were observed by optical microscopy and electron microscopy after 200 days of exposure. The results showed that the amplitude of ERG was higher than that of the A wave and B wave in the abdominal cavity, and the inhibitory effect of ERG was confirmed. Morphological observation, optical microscopy, electron microscopy, observation of the outer segment of the cell plate structure, projection and group, comparison of the number of intentional morphology The analysis of CNTF(ciliaryneurotrophic factor) gene expression was carried out by RT-PCR. The amount of time it takes to get the quality of the product is up. To investigate the characteristics of the film and its development The molecular mechanism of CNTF is very important. The results of the treatment of this drug are shown in the table below.