転写因子の発現による未分化間葉系幹細胞の骨芽細胞への分化

通过转录因子的表达将未分化间充质干细胞分化为成骨细胞

• 批准号: 18659625
• 负责人: 小方 頼昌
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659625/
• 关键词: 遺伝子プロモーター; 転写調節; 石灰化; 骨芽細胞; 遺伝子発現; 転写因子; 成長因子; ホルモン; フラボノイド; ケルセチン; 骨シアロタンパク質

ROS17/2.8骨芽細胞様細胞において,BSPmRNA量は1μg/mlのリポポリサッカライド(LPS)刺激で経時的に減少した。また,細胞をテステステロン(DHT,O^<-8>M,24h)で刺激してもBSPmRNAの発現は変化しなかったが,細胞内にアンドロゲン受容体(AR)を過剰発現させるとBSPmRNA量は増加した。転写開始点から-108塩基対上流およびそれよりも上流のBSPプロモーター配列を含むルシフェラーゼコンストラクトの活性は,LPSにより抑制された。ROS17/2.8細胞内にARを過剰発現させると,-ll6塩基対上流およびそれよりも上流のBSPプロモーター配列を含むルシフェラーゼコントラストで転写活性が上昇した。ゲルシフトアッセイの結果,FREおよび3'-FRE配列に結合する核内タンパク質は,LPS刺激後,経時的に減少した。cAMP応答配列(CRE)に対する結合は,LPS刺激後変化はないが,アイソトープ標識していない40倍濃度のCRE配列を加えると結合が減少した。CREおよびアクチベータープロテイン1/グルココルチコイド応答配列(AP1/GRF)とROS17/2.8細胞から抽出した核内タンパク質との結合は,コントロールおよびDHT(10^<-8>M,24h)刺激に比べて,ARを発現させた核内タンパク質で増加し,AP1/GREでは2本のバンドが認められた。抗体を用いたゲルシフトアッセイおよび免疫沈降法の結果,CRE配列にはリン酸化CRE結合タンパク質,ARおよびc-Fos,AP1/GRE応答配列にはARおよびc-Fosが結合していると考えられた。

ROS17/2.8 bone bud cells were stimulated by LPS, and BSP mRNA decreased by 1μg/ml. In addition, the expression of BSP mRNA in cells stimulated by DHT (DHT,O^<-8>M,24h) increased, and the expression of BSP mRNA in intracellular receptor (AR) increased. Start point: -108 ROS17/2.8 cells AR gene expression increased in the first six months of this year, and the BSP gene expression increased in the second six months of this year. As a result,FRE and 3'-FRE alignment resulted in a decrease in nuclear protein after LPS stimulation. cAMP response sequence (CRE) binding was decreased after LPS stimulation, and CRE binding was increased at 40-fold concentrations. CRE and ROS17/2.8 cells were extracted from the nucleus and the nuclear mass was combined with CRE and DHT(10^<-8>M,24h) stimulation. AR was found to increase the nuclear mass, AP1/GRF was found to increase the nuclear mass, AP1/GRF was found to increase the nuclear mass. The results of antibody and immunoprecipitation assay showed that CRE binding protein,AR binding protein and c-Fos binding protein, AP1/GRE binding protein,AR binding protein and c-Fos binding protein were different.

项目成果

Effects of Quercetin and Quercetin 3-Glucuronide on the Expression of Bone Sialoprotein Gene

槲皮素及槲皮素3-葡萄糖苷酸对骨唾液酸蛋白基因表达的影响

• 发表时间: 2007
• 期刊: J Cell Biochem 101
• 作者: Dong-Soon Kim;Takai H;Arai M;Araki S;Mezawa M;Kawai Y;Murota K;Terao J;Ogata Y.
• 通讯作者: Ogata Y.

骨シアロタンパク質(BSP)遺伝子の転写に対するアンドロゲン受容体の効果

雄激素受体对骨唾液蛋白（BSP）基因转录的影响

• 发表时间: 2007
• 期刊: 日本歯周病学会会誌 49
• 作者: 高井英樹;小方頼昌
• 通讯作者: 小方頼昌

エナメルマトリックスタンパク質中の骨形成促進因子

牙釉质基质蛋白中的成骨因子

• 发表时间: 2007
• 作者: 高井英樹;小方頼昌;Kim Dong-Soon et al.;Takai Hideki et al.;小方頼昌
• 通讯作者: 小方頼昌

Androgen Receptor Stimulates Bone Sialoprotein(BSP)Gene Transcription via cAMP Response Element and Activator Protein/Glucocorticoid Respose Element.

雄激素受体通过 cAMP 响应元件和激活蛋白/糖皮质激素响应元件刺激骨唾液蛋白 (BSP) 基因转录。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Cellular Biochenistry 102
• 作者: Hideki Takai;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Androgen receptor stimulates bone sialoprotein(BSP) gene transcription via cAMP response element and activator protein 1/gluco corticoid response elements

雄激素受体通过cAMP反应元件和激活蛋白1/糖皮质激素反应元件刺激骨唾液蛋白（BSP）基因转录

• 发表时间: 2007
• 期刊: Jounal of Cellular Biochemistry 102
• 作者: 伊藤 太一;伊藤 明代;北川 博美;法月 良江;伊藤 寛史;吉田 有智;小田 貴士;猿田 浩規;安田 雅章;鈴木 憲久;古谷 義隆;荒瀧 友彦;奥田 克爾;加藤 哲男;武田 孝之;椎貝 達夫;飯島 俊一;添島 義和;矢島 安朝;Hideki Takai
• 通讯作者: Hideki Takai