权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

エオジン好性核内封入体(NIHID)の原因遺伝子の探索・同定

搜索和鉴定负责嗜酸性核内含物的基因 (NIHID)

基本信息

批准号：
19659225
负责人：
田中章景
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659225/
关键词：
NIHID 神経変性疾患連鎖解析核内封入体

项目摘要

我々が既に報告しているNeuronal intranuclear hyaline inclusion disease (NIHIDもしくはNIID:エオジン好性核内封入体病)の二大家系のDNAサンプルを用いて原因遺伝子検索を行った。マイクロサテライトマーカー(ABI PRISM Linkage Mapping Set Version2.5 MD10)、LINKAGEソフトウエアを用いた連鎖解析により、原因遺伝子の存在が予測される染色体上の部位でのLod score 5.01を得た。次に、この近傍の約20cMの部分について、NEDO(新エネルギー産業技術総合開発機構)から公開されているGDBS (Gene Diversity DataBase System)の情報を検索し、更に細分化して解析可能なマイクロサテライトマーカー6個を選択し、再度、パプロタイプ解析およびLINKMAPソフトウエアを用いた3点連鎖解析を行った。その結果、染色体上の約3.8Mbpといったきわめて狭い領域で、突出したLod score 4.65を示す領域を見いだし、原因遺伝子が存在する領域を絞り込むことに成功した。そして、この領域に存在する21個の遺伝子に関してプライマーを設計し、シークエンス解析により原因遺伝子および変異の同定を進めた。一方、これらの家系から得られた剖検サンプルを用い、核内封入体の分布、神経細胞脱落の様式、分布を明らかにし、さらに、電子顕微鏡を用いた封入体の解析、免疫染色法を用いた封入体構成成分の解析を行った。また、抽出したタンパク質サンプルを用いた二次元電気泳動および銀染色により、核内封入体構成成分の同定、発現変化を示す蛋白の同定を試みた。

We report that two large families of DNA carriers with Neuronal intranuclear hyaline inclusion disease (NIHID) have been identified for use in genetic engineering. ABI PRISM Linkage Mapping Set Version2.5 MD10, LINKAGE software for genetic linkage, the presence of genetic markers for prediction, the location on the chromosome, Lod score 5.01. In addition, NEDO(New Energy Industry Technology Development Organization) has opened up the information of GDBS (Gene Diversity DataBase System) to search for, and further subdivide, the analysis of possible 6-point genetic linkage, and the analysis of LINKMAP. The result is that the chromosome is about 3.8Mbp in the narrow field, prominent in the Lod score 4.65, showing the field is about 3.8Mbp in the narrow field, and the cause is about 3.8Mbp in the narrow field. There are 21 different genes in this field, which are related to the design, analysis and analysis of the causes. A method for analyzing the composition of the inclusion by electron microscopy and immunostaining was developed. The identification of the components of the nuclear inclusions and the identification of the proteins in the nuclear inclusions were studied.