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KK-Periomeデータベースを用いた新規歯周病創薬ターゲットの網羅的探索

使用 KK-Periome 数据库全面搜索新的牙周药物发现靶点

基本信息

批准号：
19659549
负责人：
齋藤正寛
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、歯根膜の発生および再生に関わる分子群の全貌を明らかにするために、ヒト歯根膜遺伝子発現プロファイリングデータベースを作製し、同データベースより歯根膜発生に関わる機能分子を網羅的にスクリーニングした。その結果、f-spondinが歯根膜の発生原基である歯小嚢に特異的に発現することを見出した。f-spondinの発現パターンを解析すると、発生期歯胚の歯小嚢で高発現するが、歯小嚢が歯根膜に分化するとその発現は明らかに低下した。そこでf-spondinの機能解析を行う目的に、培養ヒト歯根膜細胞にf-spondinを過剰発現させ、歯根膜細胞分化に及ぼす影響を解析した。歯根膜はコラーゲン線維に富む結合組織であることから、コラーゲン線維の主成分であるI型コラーゲンならびにコラーゲン線維形成を調整するXII型コラーゲンの遺伝子発現レベルをrealtime PCRで定量した。その結果、f-spondinを過剰発現しているヒト歯根膜細胞ではI型ならびにXII型コラーゲンの遺伝子発現が顕著に低下することが確認された。次にshRNAiを用いてヒト歯根膜細胞においてf-spondin遺伝子発現を挿制したところ、I型ならびにXII型コラーゲンの遺伝子発現の増加が認められた。この結果より、f-spondinはコラーゲン線維形成に関わる遺伝子発現を抑制することから、同分子が歯根膜細胞分化を抑制している可能性が示唆された。そこで免疫不全マウスへの皮下移植実験による分化誘導系を用いて、f-spondinを過剰発現させたヒト歯根膜細胞の分化能力を判定した。一ヶ月移植後に移植片を摘出し、歯根膜細胞の分化マーカーであるtenascin-Nの発現を解析した。その結果、F-spondinを過剰発現させたヒト歯根膜細胞移植片では、tenascin N発現が顕著に低下していることが判明した。以上の結果よりF-spondinは歯小嚢において、歯根膜細胞分化を抑制する因子であることが示された。今後はf-spondinの歯小嚢発生に及ぼす影響を解析し、歯根膜発生おける機能を解明していく予定である。

This study provides an overview of molecular groups involved in the development and regeneration of dental root membranes, and provides an overview of molecular groups involved in the development and regeneration of dental root membranes. As a result, f-spondin is found in the development of root membranes. The development of f-spondin is analyzed and the development of tooth germ is high. The development of tooth germ is low. To analyze the function of f-spondin, the development of f-spondin in cultured root membrane cells, the differentiation of root membrane cells and the influence of f-spondin on root membrane differentiation. The main components of the root membrane are type I, type II, type XII, type XII. The results showed that the expression of f-spondin in root membrane cells was lower than that in type I and type XII root membrane cells. The expression of f-spondin gene in root membrane cells was inhibited by shRNAi, and the expression of f-spondin gene in type I and type XII cells was increased. These results suggest that f-spondin may be involved in inhibiting the development and differentiation of root membrane cells. To determine the differentiation ability of root membrane cells in the subcutaneous transplantation of immunocompromised cells using f-spondin induction system. A month after transplantation, the root membrane cells were extracted and differentiated into tenascin-N. The results showed that F-spondin was detected in the root membrane cell graft and tenascin was detected in the root membrane cell graft. The above results indicate that F-spondin inhibits the differentiation of root membrane cells. In the future, we will analyze the effect of f-spondin on the development of dental tissue and determine the function of dental root membrane development.