水晶発振子バイオセンサーを用いたマイコトキシンの迅速検査法の開発

使用晶体振荡器生物传感器开发霉菌毒素快速检测方法

• 批准号: 20659019
• 负责人: 川村 理
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kagawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20659019/
• 关键词: マイコトキシン; 抗原抗体反応

マイコトキシンは、カビが産生する有毒2次代謝産物で、様々な農作物や食晶を微量汚染しており、耐熱性で調理程度の加熱ではほとんど分解しない。よって、マイコトキシンを迅速かつ高感度に測定し、汚染食品を排除することが食の安全において重要である。そこで、水晶発振子バイオセンサーを用い、抗原抗体反応を利用したデオキシニバレノール(DON)とアフラトキシンB_1(AFB_1)の迅速検査法の開発することを本研究の目的とした。1.抗体の作製抗DONと抗AFB_1モノクローナル抗体産生細胞を無血清培地で大量培養し、培養上清を回収後、硫安分画法で精製抗体を調製した。2.測定系の検討生体分子間相互作用定量QCM装置AFFINIX Qを用いて、特に迅速測定法の必要性が高いDONとAFB_1の測定のための測定系を検討した。(1)直接法抗体を振動子に固定化し、規制値に相当するDON又はAFB_1標準品を加え測定を行ったが、いずれの場合も反応が微弱で測定できなかった。(2)競合法振動子に結合する質量を増幅させれば、測定が可能となる。そこで、次に規制値に相当するDONとDON-OVA結合体又はAFB_1とAFB_1-BSA結合体とを同時に加え競合法について検討した。その結果、DONでは、規制値の約1/5程度相当までの測定が可能であったが、AFB_1の揚合は、規制直相当の濃度では、反応が微弱で測定できなかった。以下の実験は、DONのみで行った。(3)DON汚染穀物への適用性の検討競合法で、DONを各濃度添加した小麦を調製し、アセトニトリルー水で抽出し、祖抽出液中のDONを測定し、本法の穀物検体への適用性を検討した。その結果、小麦からの抽出マトリックス存在下では、抽出マトリックスが振動子や抗体およびDON-OVAに付着し、規制値相当量のDONの検出も不可能であった。抽出マトリックスの付着防止のために界面活性剤の添加も試みたが、現時点では解決していない。

The food of the second generation is poisonous, the food crystal of the crop is stained with trace amounts, and the degree of tolerance is increased. Rapid detection, high sensitivity test, dye food elimination, food safety, food safety, food safety. The antigens and antibodies were used in this study by using the rapid method (DON) to detect the antigens B _ 1 (AFB_1) and the antigens and antibodies. 1. The antibody was used as anti-DON, anti-AFB_1 antibody, antibody, serum, serum, supernatant, thioampere and thioampere method. two。 Determination of intermolecular interaction in vivo quantitative QCM device AFFINIX Q rapid determination of the need for high performance AFB _ 1 determination of molecular interaction in vivo. The main results are as follows: (1) the antibody vibrator is immobilized by the direct method, the standard DON is quite good, and the AFB_1 standard is used to determine the temperature. (2) the legal vibrator is used to measure the amplitude of the vibrator, and the measurement is possible. Both DON and substandard specifications are equivalent to the combination of AFB_1 and AFB_1-BSA. At the same time, it is necessary to increase the number of users. The results of the test, the DON performance, and the specification are about 1. 5. The accuracy of the measurement may be high, the AFB_1 may be close, the specification is the same as the standard, and the sensitivity may be measured by the weak measurement. The following is a list of the following lines, DON. (3) DON dye material, sex test, DON test, DON test in ancestral extract, addition of wheat to each degree, determination of water extraction, determination of DNA in ancestral extract, determination of usability in this method. The results showed that it was not possible for the wheat to extract the DON in the presence of the temperature, to extract the antibody to the antibody, to pay for the DON-OVA, and to determine the equivalent of the standard. The purpose of the extraction is to prevent the interface activity of the interface from adding the information, and to solve the problem at the right time.