光合成チラコイド膜の光化学系タンパク質複合体のサブユニット・トポロジーの研究

光合类囊体膜光系统蛋白复合物亚基拓扑结构的研究

• 批准号: 03454013
• 负责人: 池内 昌彦
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03454013/
• 关键词: 光合成; 光化学系I; 光化学系II; 膜タンパク質複合体; 水分解系; 藍藻; チトクロムC550; 葉緑体DNA

(1)光合成膜に多く含まれる脂質や膜タンパク質の可溶化に用いる界面活性剤はタンパク質の分析(SDSゲル電気泳動)を妨害することが多いが,これらを抽出する常法では低分子の疎水性タンパク質が失われやすいことが明らかになった.これを克服するために,メタノール/エーテルの混合抽出法を開発した.(2)シアノバクテリア(Synechocystis PCC6803)の種々の系II遺伝子の人為変異体における系IIタンパク質の蓄積を特異抗体とプロテインシーケンシングによって定量し,サブユニット間の相互作用を調べた.Kタンパク質がCP43によって,Hタンパク質がCP47によって安定化されていること,D2タンパク質は他のサブユニットの安定化に関与しているが代謝回転の早いD1タンパク質はあまり関与していないことなどが明らかになった.これらの結果から,系II複合体の構造モデルを提唱した.(3)上記のシアノバクテリアの系II複合体を単離し,反応中心の5kDaタンパク質を同定し,そのアミノ酸配列から遺伝子(psbI)をクローニングした.現在,タンパク質の抗体とその遺伝子を不活性化した変異体を作成し,このタンパク質の構造と機能を調べている.(4)好熱性シアノバクテリアの系II複合体のタンパク質間の架橋物を分析して,表在性の12kDaタンパク質がD2および33kDaタンパク質の近傍にあることを明らかにした.一方,チトクロムc550も架橋産物を生成したが,この架橋相手は今後の解析の予定である.

(1)Photosynthetic film contains many kinds of lipid and film, which are used in the solubilization of lipid and film. The interfacial active agent is used in the analysis of SDS and electrophoresis. To overcome this problem, the hybrid extraction method was developed. (2)シアノバクテリア(Synechocystis PCC6803) is a member of the family II gene family. It is a member of the family II gene family. D2 is the most important part of the process of metabolism. The result is that the structure of II complex is very complex. (3)In the above description, the 5kDa protein in the anti-tumor center of the complex II was identified, and the acid ligand (psbI) in the complex II was identified. Now, the antibody of the protein and the gene of the protein are inactivated, and the structure and function of the protein are adjusted. (4)The thermal properties of the 12kDa complex were analyzed by using the D2 and 33kDa bridges. The bridge product is generated, and the bridge phase is analyzed.

项目成果

M.Ikeuchi et.al.: "Topography of photosystem II complex" Research in Photosynthesis.

M.Ikeuchi 等人：“光系统 II 复合体的拓扑结构”光合作用研究。

J.-R.Shen et al.: "Stoichiometric association of extrinsic cytochrome c550 and 12kDa protein with a hiahly purified oxygen-evolving photosystem II core complex from Synechococcus vulcanus" FEBS Lett.301. 145-149 (1992)

J.-R.Shen 等人：“外在细胞色素 c550 和 12kDa 蛋白与来自聚球藻的高度纯化的释氧光系统 II 核心复合物的化学计量关联”FEBS Lett.301。

J-R.Shen et al.: "Stoichiometric association of extrinsic cytochrome c550 and 12 kDa protein with a highly purified oxygen-evolving photosystem II core complex from Synechococcus vulcanus" FEBS Letters.

J-R.Shen 等人：“外在细胞色素 c550 和 12 kDa 蛋白与来自聚球藻的高度纯化的释氧光系统 II 核心复合物的化学计量关联”FEBS Letters。

M.Ikeuchi et al.: "A novel 3.5 kDa protein component of cyanobacterial photosystem I complexes" Plant Cell Physiol.33. 1057-1063 (1992)

M.Ikeuchi 等人：“蓝藻光系统 I 复合物的新型 3.5 kDa 蛋白质成分”Plant Cell Physiol.33。