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好熱性シアノバクテリアのセルロースとセルロース合成酵素の解析

嗜热蓝藻中纤维素和纤维素合酶的分析

基本信息

批准号：
17657013
负责人：
池内昌彦
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞凝集が誘導される低温培養時のセルロースの解析を検討した。まずさまざまなセルロースや多糖の定量法を検討したが、夾雑物が多く、また検出特異性が低いことが判明した。一方、セルラーゼ処理が細胞凝集を解消するので、この処理で放出されるグルコースを定量する方法を検討した。その結果、セルラーゼやセロビアーゼ処理で大量にグルコースが放出されることを見いだした。しかし、セルロースの完全分解にはまだ至っていない。この結果、短鎖のβ1→4結合からなるセロビオース様の多糖が多く含まれていることが判明した。セルロースの抽出法で十分に抽出できない理由の一端が、このセロビオース様の多糖の蓄積である可能性が高い。セルロース合成酵素Tvtlr1795をtrcプロモータを用いて強制的に発現させるDNAを常温性シアノバクテリアに導入し、形質転換体を得た。Hisタグを導入して発現させたTvTlr1795タンパク質をニッケルカラムクロマトグラフィーによって膜画分から精製することに成功した。酵素活性の同定は現在進行中である。他のセルロース合成酵素Tvtlr1930-33、Tvtlr0007の発現コンストラクトの作成も試みたが、コード領域の配列に問題があり、まだ完成していない。この発現系の確立を参考にして、大腸菌でのセルロース合成酵素の大量発現系の構築を現在検討している。また、この発現系でのセルロースの定量を試みた。

Cell agglutination was used to analyze the temperature during low temperature culture. The method of quantitative analysis of polysaccharides showed that there were many kinds of polysaccharides, and that the sex was low and that the polysaccharides were identified. On the one hand, the method of cell agglutination is used to solve the problem of cell agglutination, and the method of quantitative analysis is released. The results show that a large number of people have been released from the hospital. This is the first time to completely decompose the data from one to the other. The results showed that the combination of β 1-4 and β 1-4 showed that the polysaccharides were identified by the combination of β 1-4 and β 1-4. The extraction method is very easy to extract. The reason is that there is a high probability that polysaccharides are stored. The synthetic enzyme Tvtlr1795, trc, DNA, temperature, temperature, temperature and temperature. In the His system, you can see that you can see that you are successful in the film painting. You can see that the film painting is successful. The activity of the enzyme is the same as that of the enzyme. The synthetic enzyme Tvtlr1930-33 and Tvtlr0007 were used to make the synthetic enzyme Tvtlr1930-33, Tvtlr1930-33, Make sure that there are a large number of synthetic enzymes in the system. It is necessary to make a quantitative test on the basis of the actual situation.

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Isolation, subunit composition and interaction of the NDH-1 complexes from Thermosynechococcus elongatus BP-1

DOI：
10.1042/bj20050390
发表时间：
2005-09-01
期刊：
BIOCHEMICAL JOURNAL
影响因子：
4.1
作者：
Zhang, PP;Battchikova, N;Aro, EM
通讯作者：
Aro, EM

Biochemical and functional characterization of BLUF-type flavin-binding proteins of two species of cyanobacteria.

DOI：
10.1093/jb/mvi089
发表时间：
2005-06
期刊：
Journal of biochemistry
影响因子：
2.7
作者：
K. Okajima;Shizue Yoshihara;Y. Fukushima;Xiaoxing Geng;Mitsunori Katayama;S. Higashi;Masakatsu Watanabe-Masakatsu-Wat
通讯作者：
K. Okajima;Shizue Yoshihara;Y. Fukushima;Xiaoxing Geng;Mitsunori Katayama;S. Higashi;Masakatsu Watanabe-Masakatsu-Wat

Large-scale analysis of chlorophyll fluorescence kinetics in Synechocystis sp PCC 6803:: Identification of the factors involved in the modulation of photosystem stoichiometry