权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ANALYSIS OF HEMOPOIETIC MECHANISMS IN THE FETAL LIVER USING AN ESTABLISHED FETAL HEPATOCYTIC CELL CLONE

使用已建立的胎儿肝细胞克隆分析胎儿肝脏的造血机制

基本信息

批准号：
03454114
负责人：
ITOH Tsunetoshi
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B).
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至 1992
项目状态：
已结题

项目摘要

胎生肝は胎生時代における重要な造血器官である。その機構を明らかにするために我々は胎生15日のBALB/cマウスの肝臓から上皮細胞クローン(FHC-4D2)を樹立し、その株細胞が持つ造血支持機能の解析を行った。昨年度の報告では4D2は骨髄細胞に対しても胎仔肝造血細胞に対しても増殖促進作用を示し、その働きは4D2の分泌するCSF活性によること、それらはM-CSF及びGM-CSFであることがわかった。さらに、4D2はその単層培養上で骨髄造血細胞を12週間、外来性の造血コロニー増殖因子のない状態で維持した。2週間以上の培養では造血細胞との直接の接触が必要だった。4D2は5-FU投与マウスの骨髄細胞も維持した。Limiting dilution analysisでは4D2が未熟な前駆細胞をGM-CFCまで分化させることがわかった。一方、4D2単層培養上にマウス胎仔胸腺リンパ球をのせヒトrlL-2を100U/mlを加えた状態で培養すると、約2週間で胎仔胸腺リンパ球が増殖し、増殖してきたリンパ球はThy1陽性で、ほぼ10%がCD3に染色された。CD3陽性のうち、ほとんどがTCRγδ型で、Vγ5を発現しており、大半がCD8ααのタイプで細胞障害活性が認められた。また、4D2はBリンパ球に対しても支持作用を発揮したが、表面に免疫グロブリンを発現しない未熟なBリンパ球が産生され、肝細胞株のみではそれ以上には分化が進まなかった。それらをWhitlock-Witteの培養に移すと表面に免疫グロブリンを発現するまでになった。本年度での研究で、長期培養系では4D2と前駆細胞の細胞間相互作用(接触)によって造血細胞が支持されることが明かとなった。さらに解析の結果、造血支持作用に加えて胎仔型Tリンパ球および熟なBリンパ球の増殖作用も持つことが証明された。

The viviparous liver is an important hematopoietic organ. The analysis of hematopoietic support function of BALB/c cells derived from liver epithelial cells (FHC-4D2) on the 15th day of fetal life. Last year's report showed that 4D2 promotes proliferation in fetal liver hematopoietic cells, and that 4D2 secretes CSF activity in both M-CSF and GM-CSF. In addition, 4D2 cells were maintained in the presence of exogenous hematopoietic growth factors for 12 weeks in monolayer culture. Direct contact with hematopoietic cells in culture for more than 2 weeks is necessary. 4D2-FU administration and maintenance of bone marrow cells Limiting dilution analysis Fetal thymus cells were cultured in 4D2 single layer medium at 100U/ml for about 2 weeks. Fetal thymus cells were cultured at 100U/ml. CD3 positive cells, TCRγδ cells, Vγ5 cells, CD8 α cells, CD9 cells, CD8 cells, CD8 cells, CD9 cells, CD 4D2 is a cell line that supports the development of immune response, the development of immune response, the production of immature cells, and the development of differentiation. The Whitlock-Witte culture system was developed on the surface. This year's research, long-term culture lines are 4D2 cells and cell-cell interaction (contact) between hematopoietic cells. The results of analysis, hematopoietic support and fetal T cell proliferation were demonstrated.

项目成果

期刊论文数量（26）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

伊藤恒敏、畠雅弘、土井秀之、鈴木隆二、坂田恒昭、里見進、南野昌信: "胎仔肝上皮細胞株によるγδ型T細胞の誘導" Minophagen Medical Review,Supplement. (1993)

Tsunetoshi Ito、Masahiro Hatake、Hideyuki Doi、Ryuji Suzuki、Tsuneaki Sakata、Susumu Satomi、Masanobu Minamino：“胎儿肝上皮细胞系诱导 γδ T 细胞”Minophagen 医学评论，补充（1993）。