The study of the production of human antibody in vitro expression system and recognition of epitope on the HA protein by human immune system.
人抗体体外表达系统的产生以及人免疫系统对HA蛋白上表位的识别的研究。
基本信息
- 批准号:04454202
- 负责人:
- 金额:$ 4.29万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
- 财政年份:1992
- 资助国家:日本
- 起止时间:1992 至 1994
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Influenza A virus is unique among human viruses in its capacity to alter the antigenic phenotype with relative ease and evade neutralizing antibodies. This property has been occurred with a small amount amino acid changes. Mous monoclonal antibody study revealed that many epitopes exist on the HA protein Why the small amino acid change on the HA protein help to evade human neutralizing antibodies. To understand the reason, we should analyze the huma immune-system for HA protein of influenza A virus. We studied two system. On is the approach to produce human monoclonal antibodies by in vitro expression system. Second one is to analyze human serum with epitope scanning system. For the development of the system to produce human monoclonal antibody, we tried to produce mouse monoclonal antibodies for influenza HA protein with using mouse hybridoma mRNA.Immunozap expression vector system (STRATAGENE Co.) did not work. We did not identify the production of an antibody in E.Coli. Recently, single strand antibody system has developed. We used this system. Antibody production was detected with western blot. The specificity of this antibody was weak to identify the HA protein. However, this system seems to be useful for in vitro antibody production with some modification. Epitope scanning methods indicated that 10 amino acid peptide identified some epitopes but still remained some ambiguous. So we are now trying 12 amino acid system.
甲型流感病毒在人类病毒中是独一无二的,因为它能够相对容易地改变抗原表型,并逃避中和抗体。这一特性发生在少量氨基酸变化的情况下。小鼠单克隆抗体研究揭示了HA蛋白上存在许多表位,为什么HA蛋白上的小氨基酸改变有助于逃避人的中和抗体。为了了解原因,我们应该分析人类免疫系统对甲型流感病毒HA蛋白的反应。我们学了两个系统。本文介绍了利用体外表达系统制备人单克隆抗体的方法。二是利用表位扫描系统对人血清进行分析。为了研制人流感HA蛋白单克隆抗体系统,我们尝试利用小鼠杂杂瘤mRNA制备小鼠流感HA蛋白单克隆抗体。Immunozap表达载体系统(STRATAGENE公司)不起作用。我们没有发现在大肠杆菌中产生抗体。近年来,单链抗体系统得到了发展。我们用了这个系统。western blot检测抗体产生。该抗体对HA蛋白的特异性较弱。然而,该系统似乎是有用的体外抗体生产一些修改。表位扫描方法表明,10个氨基酸肽可识别部分表位,但仍有一些不明确的地方。所以我们现在尝试12个氨基酸体系。
项目成果
期刊论文数量(20)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
中島捷久・信澤枝里・中島節子: "小児医学の進歩´92「インフルエンザウイルス変異株出現のメカニズム」" 中山書店, (1992)
Toshihisa Nakajima、Eri Shinzawa 和 Settsuko Nakajima:“儿科医学进展 92 流感病毒突变体出现的机制” 中山书店,(1992)
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
中島節子・西川文雄・中村和幸・中島捷久: "Comparison of the HA gene of type B infwenza viruses in herald waves and later epidemic seasons" Epidemiology and Infection. 109. 559-568 (1992)
Settsuko Nakajima、Fumio Nishikawa、Kazuyuki Nakamura 和 Toshihisa Nakajima:“先驱波和后来的流行季节中 B 型流感病毒的 HA 基因的比较”流行病学和感染 109. 559-568 (1992)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
中島節子・西川文雄・中村和幸・中尾春寿・中島捷久: "Reiafection with influenza B virus in children" Epidemiology and Infection. 113. 103-112 (1994)
Setsuko Nakajima、Fumio Nishikawa、Kazuyuki Nakamura、Haruhisa Nakao 和 Toshihisa Nakajima:“儿童乙型流感病毒的再感染”流行病学和感染。 113. 103-112 (1994)
- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
中島節子・西川文雄・中村和幸・中島捷久: "Reinfection with influenza B virus in children" Epidemiology and Infection. 113. 103-112 (1994)
Setsuko Nakajima、Fumio Nishikawa、Kazuyuki Nakamura 和 Toshihisa Nakajima:“儿童乙型流感病毒的再感染”流行病学和感染。113. 103-112 (1994)
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
S.Nakajima, F.Nishikawa, K.Nakamura and K.Nakajima: "Comparison of the HA genes of type B influenza viruses in herald waves and later epidemic seasons" Epidemiol.Infect.109. 559-568 (1992)
S.Nakajima、F.Nishikawa、K.Nakamura 和 K.Nakajima:“先驱波和后来的流行季节中 B 型流感病毒的 HA 基因的比较”Epidemiol.Infect.109。
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