マウス系統特異抗体を用いたキメラマウス組織の解析と認識抗原遺伝子のクローニング

使用小鼠品系特异性抗体分析嵌合小鼠组织并克隆识别抗原基因

• 批准号: 04455028
• 负责人: 日下部 守昭
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04455028/
• 关键词: キメラマウス; 細胞系譜; マウス系統特異抗体; 遺伝疾患モデル動物; ストレス蛋白; ミトコンドリア; 細胞間相互作用; 免疫組織化学; キメリズム

1)神経系異常ミュータントのリーラーマウスと正常マウス間でキメラマウスを作製し、その小脳組織のキメリズムを解析したところ、正常由来細胞の組織参加によってリーラー由来プルキンエ細胞が正常な位置に移動し機能することが分かった。しかし、正常由来の神経細胞の中にはその移動を阻害されているものもあり、リーラーマウスの異常は神経細胞の移動を支えるグリア系細胞の異常であることが示唆された。2)単抗体を用いてC3HマウスcDNAライブラリーをスクリーニングし抗原遺伝子のcDNA塩基配列とアミノ酸配列を決定し、この抗原蛋白はミトコンドリアに局在する新しい熱ショック蛋白ファミリーのひとつであることを示した。3)このcDNAを用いて陰性の系統の相同抗原遺伝子のcDNAの塩基配列を決定したところ、C3HとBALB/cの間で1925番目のGがAに、1943番目のCがGに変異している箇所が見つかったので、変異部を分離したキメラ遺伝子を作製し発現させた後、ウエスタンプロッティングにて検討した結果、後者の変異が抗体認識部位であった。4)染色体遺伝子の構造解析の結果、この遺伝子は17個のエクソンと16個のイントロンよりなっていることが解かった。この遺伝子は染色体マッピングによって18番染色体上にあることが解かった。また、この遺伝子には他にイントロンを含まない偽遺伝子が存在し、X染色体上にあることが解かった。

1) the health care system is in good health. In the normal environment, it is necessary to analyze the situation, and the normal reason for the organization to participate in the system is to move the normal location of the cell to move the machine. The normal origin of the cell is to prevent the movement of the cell in the cell, to prevent the movement of the cell, to move the cell in the cell and to instigate the movement of the cell in the cell. 2) Antibody was used to determine the antigens, cDNA, cDNA, antigens, proteins, proteins. 3) in this cDNA system, the same antigens of the same antigens were used in the cDNA cluster to determine the results of the test, the C3H BALB/c test, the 1925 program, and the 1943 program, which were used to determine the results of the test, after the data were detected, the results of the test were obtained. In the latter case, the antibody was found to be in the wrong place. 4) the results of the chromosomal mutations were analyzed, and the results of the 17 clones were analyzed, and the results of the 16 clones of the 17 clones were analyzed. I don't know what to say on the chromosomes of 18 times. The child is in existence, and the X chromosome is located on the X chromosome.

项目成果

Yoshiki,A.,Sakakura,T.,and Kusakabe,M.: "The mouse chimera during intra-uterine stages:Immunohistological analysis by using C3H strain-specificantibody." J.Histochen.Cytochem.41. 1583-1590 (1993)

Yoshiki, A.、Sakakura, T. 和 Kusakabe, M.：“子宫内阶段的小鼠嵌合体：使用 C3H 品系特异性抗体进行免疫组织学分析。”

Kawakatsu,H,Shiurba,R Obara,M.Hiraiwa,H.Kusakabe,M.Sakakura,T: "Humancarcinoma cells synthesize and secrete tenascin in vitro." Japan.J.Cancer Res.83. 1073-1080 (1992)

Kawakatsu,H,Shiurba,R Obara,M.Hiraiwa,H.Kusakabe,M.Sakakura,T：“人类癌细胞在体外合成和分泌生腱蛋白。”

Michikawa,Y.,Baba,T.,Arai,Y.,Sakakura,T.and Kusakabe,M.: "Antigenic protein specific for C3H strain mouse is a mitochondrial stress-70 protein." BBRC. 196. 223-232 (1993)

Michikawa,Y.、Baba,T.、Arai,Y.、Sakakura,T. 和 Kusakabe,M.：“C3H 品系小鼠特异的抗原蛋白是一种线粒体应激 70 蛋白。”

Atsumi,T.Miwa,Y.Eto,Y.Sigino,H.Kusakabe,M.Kitani,H.Ikawa,Y.: "The activin A-dependent proliferation of PCC3/A/1 embryonal carcinoma cells in serum-free medium." Devel.Growth.Differ.35. 81-87 (1993)

Atsumi,T.Miwa,Y.Eto,Y.Sigino,H.Kusakabe,M.Kitani,H.Ikawa,Y.：“无血清培养基中 PCC3/A/1 胚胎癌细胞的激活素 A 依赖性增殖

Michikawa,Y.,Baba,T.,Arai,Y.,Sakakura,T.and Kusakabe,M.: "Structure and organization of the gene encoding a mitochondrial stress-70 protein in mouse." FEBS letter. 336. 27-33 (1993)

Michikawa,Y.、Baba,T.、Arai,Y.、Sakakura,T. 和 Kusakabe,M.：“编码小鼠线粒体应激 70 蛋白的基因的结构和组织。”