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サイクリックヌクレチオドの瞬時的増加による心筋イオン電流増大の定量的解析

环核苷酸瞬时增加引起的心肌离子电流增加的定量分析

基本信息

批准号：
05670045
负责人：
尾野恭一
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

モルモットの心室筋細胞を単離し、cGMPのイオン電流に及ぼす効果について、パッチクランプ法により解析した。cGMPは、電極内灌流及びcaged化合物をパッチ電極内に詰める事により直接細胞内に投与した。心筋には、カテコラミン刺激で活性化されるC1電流が存在する。caged-cGMPを細胞内に投与し、低濃度カテコラミン刺激下に紫外光を照射したところ、C1電流振幅がさらに増大した。しかし、cGMP単独ではこの電流を活性化しなかった。次に、caged-cAMPを細胞内に投与し、紫外光照射によりcAMPを瞬時的に遊離した時の、C1電流の活性化を観察した。電流の活性化には数秒を要し、最大反応後徐々に不活化した。cAMP代謝阻害剤存在下では反応が持続する事から、電流の不活化は、遊離したcAMPが内因性の加水分酵素によって分解される事によると考えられた。数muMのcGMPを細胞内に投与しておくと、cAMPに対する反応がコントロールのそれと比較して有意に遅延した。以上の事から、哺乳類においてはcGMPは、cAMPの分解を抑制する事によりbeta受容体刺激を促進していると結論し、European Journal of Physiologyに発表した。さらに、cAMPによるC1電流活性化の反応速度について解析した。電流活性化はS字状の時間経過を示し、その後半部分は時定数1-2秒の指数関数でほぼ近似できた。この時間経過はcAMPの濃度に依存し、またフォスファターゼ阻害剤によって修飾されることから、チャネル蛋白の燐酸化過程を反映すると考えられた。この結果は現在投稿中である。

The cell isolation of ventricular tendon, the current of cGMP and the analysis of the results were analyzed by the method of cell isolation and current analysis. CGMP, electroactive perfusion and caged compounds were injected directly into the cells. There is something wrong with the activation and activation of C1 currents. Under the stimulation of caged-cGMP intracellular injection and low temperature radiation, the amplitude of C1 current was significantly higher than that of ultraviolet radiation. For example, the cGMP is responsible for the activation of current. The transient response time of secondary, caged-cAMP, UV-irradiated cAMP, and C1 current activation monitoring. The current current is active for a few seconds, and the maximum response time is very low. In the presence of cAMP agents, current inactivation, current inactivation, and internal factors such as water fractionation, water fractionation, degradation and degradation of cAMP, current inactivation and current inactivation are very important. Count the number of muM cGMP injections in the cells and cAMP cells in response to the delay. The above events, mammalian mammals, cGMP, cAMP dissociation inhibition, beta receptor stimulation, promotion of immune response, European Journal of Physiology profile. Temperature response, cAMP response, C1 current activation, reverse speed response, speed response, analysis. The current activation