c-kit遺伝子の発現調節機構の解析

c-kit基因表达调控机制分析

• 批准号: 05670306
• 负责人: 林 真一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670306/
• 关键词: c-kit; 血液幹細胞; Steel因子; 転写調節; Wマウス; slマウス

マウスc-kit遺伝子の組織特異的発現調節領域を固定するため、転写開始点より5′上流30kbから転写終了点の3′迄をEMBL3ゲノミックライブラリーより回収し、その内、細胞膜通過領域下流まで約100kbのSacI断片を、SV40あるいはc-kitのプロモーター/CATのベクターに組み込み、エンハンサー活性の有無を検討した。指標細胞として、c-kitを発現している精巣ライディツヒ細胞、巨核球、マスト細胞、赤芽球の細胞株を、陰性の細胞として細維芽細胞を用いた。その結果、5個の断片が転写を増強したが、増強の見られる細胞系譜は、各断片で異なっていた。その内、3個は線維芽細胞でも活性がみられるため、本来の調節領域とは考えにくい。残りの2カ所は、ともに膜通過部の付近で、ライディヒ細胞のみに活性がみられたので、この細胞系譜特異的調節領域の可能性がある。同時に検討してきたc-kitリガンド、S1の調節領域はトランスジエニックマウスを作成し、生体で発現を検討したところ、神経系をのぞき、培養系で見られたほど多くの細胞系譜では発現していなかった。そのため、この領域も生体内での機能を同様な方法で検討する予定である。転写伸展の際に制御がかかる可能性も考えプロモーター、第一、第二エクソンを含むミニ遺伝子を作成したが、陽性所見は見られなかった。最近、マスト細胞と色素細胞のc-kit発現異常W^<sh>とW^<57>マウスの変異が転写開始点の200kb以上上流に有りそうだという報告もある。私もさらにより広い範囲で探索し、血液細胞系譜特異的な領域を確認するつもりである。予想どうり、組織特異的に調節が行われているので、エンハンサー領域の単離は、c-kit陽性の幹細胞を人為的に、制御できる実験系を作り出す手だてとなる。

The tissue-specific expression regulatory domain of c-kit gene is fixed, the start point of c-kit gene is 5′ upstream 30kb, the end point of c-kit gene is 3′ to EMBL3, the downstream of c-kit gene is about 100kb, and the downstream of c-kit gene is about 100kb. Index cells, c-kit development, sperm cells, megakaryocytes, sperm cells, red bud cells, negative cells, fine bud cells The results of the five fragments are different from each other. In the inner part of the cell, 3 lines of cells are active, and the original regulatory field is active. 2. The possibility of regulatory domain specific to the cell lineage is discussed. At the same time, the regulatory domain of S1 was developed, the development of organisms was discussed, the development of nervous system was discussed, and the development of culture system was discussed. The functions of the two domains are discussed in the same way. The first and second solutions include the first and second solutions. Recently, the c-kit of the pigment cell was <sh>abnormal<57>. To explore and confirm the specific domain of blood cell pedigree We expect that tissue-specific regulation of stem cells will occur in different regions, and c-kit-positive stem cells will be artificially regulated and controlled.

项目成果

M.Ogawa: "Molecular Basis of Immune Responses." Academic Press,NY, 287 (1993)

M.Okawa：“免疫反应的分子基础。”

H.Ohno: "Conditions required for myelopoiesis in murine spleen." Immunol.Lett.35. 197-204 (1993)

H.Ohno：“小鼠脾脏骨髓细胞生成所需的条件。”

K.Takahashi: "Differentiation of dendritic cell populations in macrophage colony stimulating factor-deficient mice homozygous fo〓〓the osteopetrosis (op) mutation." J.Leukocyte Biol.53. 19-28 (1993)

K. Takahashi：“巨噬细胞集落刺激因子缺陷型纯合型骨硬化 (op) 突变小鼠中的树突状细胞群的分化。J.白细胞生物学 19-28 (1993)。

M.Ogawa: "Expression and function of c-kit in fetal hemopoietic progenitor cells:transition from the early c-kit-independent to the late c-kit-dependent wave of hemopolesis in mirine embryo." Development. 117. 1089-1098 (1993)

M.Okawa：“c-kit 在胎儿造血祖细胞中的表达和功能：从早期 c-kit 不依赖型到晚期 c-kit 依赖性的小鼠胚胎中的造血波的转变。”

Y.Furuta: "MDS-like expermental myelodysplasia:multilineage abnormal hemato-poiesis in transgenic mice harboring the SV40 large T antigen under an immuoglobulin enhancer" Exp.Hematol.21. 806-815 (1993)

Y.Furuta：“MDS 样实验性骨髓增生异常：在免疫球蛋白增强剂作用下携带 SV40 大 T 抗原的转基因小鼠中的多系造血异常”Exp.Hematol.21。