血管内皮の接着蛋白-NOを介した新しい再潅流障害機序の研究

血管内皮粘附蛋白-NO介导再灌注损伤新机制的研究

• 批准号: 05670611
• 负责人: 服部 隆一
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670611/
• 关键词: 血管内皮; NO合成酵素; 接着蛋白; 低酸素; 再潅流障害

急性心筋梗塞において、閉塞した梗塞血管の血流を再開させる再潅流療法が普及するに至ったが、これに伴う再潅流障害が問題となっている。この機序の一端を解明するために、培養血管内皮細胞(ヒト臍帯静脈、牛大動脈内皮細胞)を低酸素に暴露させ、以下の内皮細胞機能の変化を調べた。1.von Willebrand因子(血小板接着蛋白)の放出:ヒト臍帯静脈内皮細胞上清中のvon Willebrand因子量をELISAにより、定量した。低酸素暴露により、上清中のvon Willebrand因子量は有意に増加した。2.白血球接着蛋白P-selectin(GMP-140)の細胞表面への出現:P-selectinに対するモノクローナル抗体を^<125>Iでラベルし、ヒト臍帯静脈内皮細胞への特異的結合を測定した。低酸素暴露により、細胞への抗体の結合が増加したことより、P-selectinの細胞表面への出現が増加したことが確認された。3.Nitric Oxide(NO)の産生量:牛大動脈内皮細胞を低酸素に暴露させると、NO合成酵素活性が低下した。また、血管条片を用いて、その張力を測定すると、低酸素暴露後には、NOによる弛緩反応が減弱した。以上の変化は、いずれも血小板、白血球の血管壁への付着、凝集を促進し、血流の障害を起こすことにより、潅流不全を招来する。血管内皮細胞の機能障害が再潅流障害に深く関与していることが判明した。

Acute myocardial infarction and reperfusion of infarcted blood vessels have become popular, resulting in problems associated with reperfusion. One end of this sequence is explained by the regulation of endothelial cell function in cultured vascular endothelial cells (umbilical vein and bovine arterial endothelial cells) by exposure to hypoxia. 1. von Willebrand Factor (Platelet Adhesion Protein) Release: The amount of von Willebrand factor in the supernatant of umbilical vein endothelial cells is measured by ELISA. The amount of von Willebrand factor in the supernatant was intentionally increased. 2. Cell surface appearance of leukocyte adhesion protein P-selectin(GMP-140): Determination of <125>specific binding of P-selectin to human umbilical vein endothelial cells. The presence of P-selectin on the cell surface was confirmed by an increase in antibody binding to low levels of serotonin exposure. 3. Nitric Oxide(NO) production: bovine arterial endothelial cells were exposed to low levels of nitric oxide (NO) and NO synthase activity decreased. In addition, the vascular strips were used to measure the tension of the blood vessels. The relaxation of the blood vessels was reduced after exposure to low acid. The above changes include platelet and leukocyte adhesion, aggregation, and blood flow impairment. The functional impairment of vascular endothelial cells is deeply related to the re-circulation impairment.

项目成果

Hattori,R.,et al.: "Stabilization of inducible nitric oxide synthase by monoclonal antibodies." Hybridoma. 12. 763-770 (1993)

Hattori,R.,et al.：“通过单克隆抗体稳定诱导型一氧化氮合酶。”

服部 隆一ら: "低酸素による内皮の抗血栓性の低下" Jpn.Circ.J. 57. 1184-1185 (1993)

Ryuichi Hattori 等：“缺氧导致内皮抗血栓特性降低”Jpn.Circ.J. 57. 1184-1185 (1993)

Hashikawa,T et al.: "Nitric Oxide Synthase Immunoreaotiyity collocalized with NADPH-diaphorase Histochemistry in Monkey Cerebral Cortex." Brain Research. (in press). (1994)

Hashikawa,T 等人：“猴大脑皮层中一氧化氮合酶免疫反应与 NADPH 心肌黄酶组织化学共定位。”

Uchizumi,H et al.: "A Stable L-arginine-dependent Relaxing Factor Released from Cytotoxic-activated Macrophages." Am.J.Physiol. 264. H1472-H1477 (1993)

Uchizumi,H 等人：“从细胞毒性激活的巨噬细胞中释放出一种稳定的 L-精氨酸依赖性松弛因子。”