歯周病原性細菌の付着因子によるB細胞活性化機構

牙周病原菌粘附素激活B细胞的机制

• 批准号: 05671598
• 负责人: 中江 英明
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05671598/
• 关键词: Eikenella corrodens; 細菌レクチン; B細胞; マイトジェン

歯周病原性細菌であるEikenella corrodens1073の付着因子である菌体表層に存在するN-アセチン-D-ガラクトサミンに特異性を示すレクチン様物質(EcLS)を精製し、EcLSのマウスおよびヒトB細胞の活性化機構を検討した。マウスB細胞画分は、抗マウスIgGおよびIgM抗体を用いたパニング法によりマウス脾細胞から調製した。また、ヒトB細胞画分は、末梢血からEロゼット形成法によりロゼット非形成細胞を集めた後、抗T細胞単クロン抗体を用いたパニング法でT細胞を除くことにより調製した。EcLSによるB細胞のDNA合成能はトリチウムチミジンの取り込みにより測定した。その結果、マウスおよびヒトB細胞のDNA合成能はEcLSで刺激後、48時間後に最高に達した。また、マウスおよびヒトB細胞のDNA合成能促進は濃度依存的で、その至適濃度は約5μgであった。このEcLSによりB細胞のDNA合成促進能は、EcLSの特異糖であるN-アセチル-D-ガラクトサミンを加えることにより阻害されたが、EcLSに特異性を示さないグルコースなどを加えても阻害は起こらなかった。また、マウスおよびヒトにおいても、B細胞画分のみをEcLSで刺激した時よりも、T細胞画分およびマクロファージ画分が混在している画分をEcLSで刺激した時の方が、DNA合成能がわずかに促進された。しかしながら、EcLSをB細胞画分あるいはヒト末梢血画分と培養しても、IL-6の産生の上昇は認められなかった。また、EcLSをB細胞画分と培養すると、IgMクラスの抗体およびわずかでわあるがIgGクラスの抗体が培養上清中に検出された。また、培養系にN-アセチル-D-ガラクトサミンを添加すると、抗体産生能も阻害された。以上の結果から、EcLSはB細胞上のN-アセチル-D-ガラクトサミンを含む糖鎖を認識してB細胞の増殖を促進するだけでなく、抗体産生細胞への分化をも促進することを明かにした。

Pathogenic bacteria around the tummy: Eikenella The presence of corrodens1073 on the surface of bacterial cells and the specific The nature of the EcLS substance (EcLS) is refined, and the EcLS B cell activation mechanism is used. Masu B cells were drawn and divided, and anti-Masu IgG and IgM antibodies were prepared using the いたパニング method and によりマウス splenocytes.また, ヒトB cell drawing, peripheral blood からEロゼット forming method, によりロゼットnon-forming cell を collection Afterwards, the anti-T cell monoclonal antibody was prepared by using the T cell depletion method using the いたパニング method. The DNA synthesis ability of EcLS B cells was measured using the DNA synthesis method. As a result, the DNA synthesis ability of B cells reached the highest level after 48 hours of EcLS stimulation. The DNA synthesis of また、マウスおよびヒトB cells can be promoted in a concentration-dependent manner. The optimal concentration of でその is about 5μg であった.このEcLS's DNA synthesis promoting ability in B cells, EcLS's specific sugar であるN-アセチル-D-ガラクトサミンをAdded えることにより hinders されたが, EcLS shows specificityさないグルコースなどを加えても hinders は出こらなかった.また、マウスおよびヒトにおいても、B cell drawing pointsのみをEcLSでstimulationした时よりも、T cell drawing pointsおよびマThe クロファージ draw points are mixed in the しているdraw points をEcLSでstimulationした时の方が, and the DNA synthesis energy がわずかにstimulationされた.しかしながら, EcLS をB cell drawing points, あるいはヒト peripheral blood drawing points, culture しても, IL-6 production のrise は cognition められなかった.また, EcLS B cell analysis and culture すると, IgM クラスのantibody およびわずかでわあるがIgGクラスのantibodyがに検出された in the culture supernatant.また, culture system にN-アセチル-D-ガラクトサミンを added すると, antibody production can inhibit された. The above results show that N-Analysis-D-Analysis-containing sugar locks on EcLS B cells are recognized. The proliferation of B cells is promoted and the differentiation of antibody-producing cells is promoted.

项目成果

Nakae,H.et al.: "Mitogenic stimulation of murine B lymphocytes by the N-acetyl-D-galactosamine specific bacterial lectin-like substance from Eikenella corrodens." FEMS Microbiol.Lett.(in press). (1994)

Nakae,H.et al.：“来自 Eikenella corrodens 的 N-乙酰基-D-半乳糖胺特异性细菌凝集素样物质对小鼠 B 淋巴细胞的有丝分裂刺激。”