歯周病原性細菌の付着因子によるB細胞活性化機構

歯周病原性細菌であるEikenella corrodens1073の付着因子である菌体表層に存在するN-アセチン-D-ガラクトサミンに特異性を示すレクチン様物質(EcLS)を精製し、EcLSのマウスおよびヒトB細胞の活性化機構を検討した。マウスB細胞画分は、抗マウスIgGおよびIgM抗体を用いたパニング法によりマウス脾細胞から調製した。また、ヒトB細胞画分は、末梢血からEロゼット形成法によりロゼット非形成細胞を集めた後、抗T細胞単クロン抗体を用いたパニング法でT細胞を除くことにより調製した。EcLSによるB細胞のDNA合成能はトリチウムチミジンの取り込みにより測定した。その結果、マウスおよびヒトB細胞のDNA合成能はEcLSで刺激後、48時間後に最高に達した。また、マウスおよびヒトB細胞のDNA合成能促進は濃度依存的で、その至適濃度は約5μgであった。このEcLSによりB細胞のDNA合成促進能は、EcLSの特異糖であるN-アセチル-D-ガラクトサミンを加えることにより阻害されたが、EcLSに特異性を示さないグルコースなどを加えても阻害は起こらなかった。また、マウスおよびヒトにおいても、B細胞画分のみをEcLSで刺激した時よりも、T細胞画分およびマクロファージ画分が混在している画分をEcLSで刺激した時の方が、DNA合成能がわずかに促進された。しかしながら、EcLSをB細胞画分あるいはヒト末梢血画分と培養しても、IL-6の産生の上昇は認められなかった。また、EcLSをB細胞画分と培養すると、IgMクラスの抗体およびわずかでわあるがIgGクラスの抗体が培養上清中に検出された。また、培養系にN-アセチル-D-ガラクトサミンを添加すると、抗体産生能も阻害された。以上の結果から、EcLSはB細胞上のN-アセチル-D-ガラクトサミンを含む糖鎖を認識してB細胞の増殖を促進するだけでなく、抗体産生細胞への分化をも促進することを明かにした。

歯周病原性細菌であるEikenella corrodens1073の付着因子である菌体表層に存在するN-アセチン-D-ガラクトサミンに特異性を示すレクチン様物質(EcLS)を精製し、EcLSのマウスおよびヒトB細胞の活性化機構を検討した。マウスB細胞画分は、抗マウスIgGおよびIgM抗体を用いたパニング法によりマウス脾細胞から調製した。また、ヒトB細胞画分は、末梢血からEロゼット形成法によりロゼット非形成細胞を集めた後、抗T細胞単クロン抗体を用いたパニング法でT細胞を除くことにより調製した。EcLSによるB細胞のDNA合成能はトリチウムチミジンの取り込みにより測定した。その結果、マウスおよびヒトB細胞のDNA合成能はEcLSで刺激後、48時間後に最高に達した。また、マウスおよびヒトB細胞のDNA合成能促進は濃度依存的で、その至適濃度は約5μgであった。このEcLSによりB細胞のDNA合成促進能は、EcLSの特異糖であるN-アセチル-D-ガラクトサミンを加えることにより阻害されたが、EcLSに特異性を示さないグルコースなどを加えても阻害は起こらなかった。また、マウスおよびヒトにおいても、B細胞画分のみをEcLSで刺激した時よりも、T細胞画分およびマクロファージ画分が混在している画分をEcLSで刺激した時の方が、DNA合成能がわずかに促進された。しかしながら、EcLSをB細胞画分あるいはヒト末梢血画分と培養しても、IL-6の産生の上昇は認められなかった。また、EcLSをB細胞画分と培養すると、IgMクラスの抗体およびわずかでわあるがIgGクラスの抗体が培養上清中に検出された。また、培養系にN-アセチル-D-ガラクトサミンを添加すると、抗体産生能も阻害された。以上の結果から、EcLSはB細胞上のN-アセチル-D-ガラクトサミンを含む糖鎖を認識してB細胞の増殖を促進するだけでなく、抗体産生細胞への分化をも促進することを明かにした。