歯周病原細菌の定着を促進する唾液由来凝集因子のプラークにおける局在性の検討

检查促进牙周病原菌定植的唾液衍生聚集因子在牙菌斑中的定位

• 批准号: 07672077
• 负责人: 中江 英明
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07672077/
• 关键词: Eikenella corrodens; 凝集因子; 唾液; プラーク

歯周病原細菌Eikenella corrodensを凝集させる因子(以下EcAFと略す)をヒト顎舌下腺唾液から精製し、精製EcAFをBALB/cマウスに免疫した。通法によりマウス脾細胞とマウスミエローマ細胞SP-2を細胞融合し、EcAFに対するモノクローナル抗体(以下mabと略す)を作製した結果、4種のmabを得ることができた。得られたmabはすべてlgMで、軽鎖はκ鎖であった。これらのmabはE.corrodensとEcAFの凝集と阻害能がなかったこと、さらに、E.corrodensとEcAFの凝集を阻害するガラクトースやN-アセチル-D-ガラクトサミンなどの糖が、EcAFへのmabの結合を阻害しなかったことから、得られたmabはEcAF上のE.corrodensとの結合部位から離れたところを認識するものと考えられる。EcAFとE.corrodensをin vitroで凝集させた凝集塊を通法により固定、脱水した後、水溶性樹脂に包埋し、超薄切片を作製した。一次抗体として、得られたmabおよび抗E.corrodens抗体を、二次抗体として、粒径の異なる金コロイド標識抗体を用いて超薄切片に免疫二重染色をおこない、透過型電子顕微鏡で観察した結果、E.corrodens菌体およびE.corrodensに結合しているEcAFを検出することができた。さらに、ヒトプラークを採取し、同様の方法で超薄切片を作製し、mabを用いて免疫染色した結果、プラーク中でEcAFを検出することができた。これらの結果から、今回得られたmabはEcAF上のE.corrodensへの結合部位そのものを認識することはできないが、免疫組織学的プラーク中のEcAFの局在性を検索するのに非常に有用な抗体であることが明らかになった。

Eikenella corrodens, the pathogen of peri-pathogen, agglutinated the immune factor (the following EcAF), the saliva of sublingual gland, the saliva of sublingual gland, the BALB/c of semen and the immune factor of EcAF. According to the general method, the results of SP-2 cell fusion, EcAF cell fusion, anti-mab antibody (the following mab) and 4-cell mab were determined. You have to tell me that you have to mab the lgM, and that you have to pay the bills. The combination of mab E.corrodens EcAF agglutination, EcAF mab agglutination, and E.corrodens mab agglutination was effective. The results showed that the combination of mab EcAF and E.corrodens agglutination was effective, and the results showed that there was no significant difference between them. EcAF, E.corrodens, in vitro, agglutination, agglutination, fixation, dehydration, water-soluble fat embedding, ultra-thin section. The primary antibody test, mab antibody assay, anti-E.corrodens antibody test, secondary antibody assay, particle size assay, particle size identification, ultrathin section immunostaining, double staining, transmission electron microscopy, E.corrodens cell E.corrodens and EcAF were used to detect the results. In the same method, the ultrathin section was used as a marker, mab immunostaining was used to analyze the results, and EcAF was used in the test. The results show that this time, the E.corrodens junction on the mab EcAF is very useful. In the immunology, the EcAF is very useful in the study of sex.

项目成果

平尾清司: "歯周病原細菌の付着を促進させるヒト顎舌下腺唾液糖蛋白に対するモノクローナル抗体の作製" 日本歯周病学会会誌. 38(in press). (1996)

Kiyoshi Hirao：“抗人舌下腺唾液糖蛋白的单克隆抗体的制备，该抗体可促进牙周病原菌的粘附”，日本牙周病学会杂志38（出版中）。